张博睿

【摘要】为了鉴定分析球囊菌（Ascosphaera apis）几丁质酶基因分子特征，预测其编码蛋白的生物学功能，本实验对球囊菌几丁质酶基因Am-KZZ89578进行了PCR扩增，应用生物信息学方法对其编码氨基酸序列进行分析，预测编码蛋白的三级结构。结果显示， Am-KZZ89578基因全长958bp， 编码 421个氨基酸。多重序列比对和系统进化分析表明，Am-KZZ89578蛋白为几丁质酶GH18家族Group-Ⅲ亚家族成员，该蛋白的预测三级结构呈弯曲螺旋结构形式。本实验结构为球囊菌几丁质酶基因编码蛋白的生物学功能研究提供了基础参考。

【关键词】球囊菌 几丁质酶 基因 PCR

【中图分类号】G633.91 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089（2018）37-0131-03

几丁质（Chitin）是由N-乙酰氨基葡萄糖胺以β-1-4-糖苷键链接而成的线性多聚糖[1]，在自然界中几丁质是昆虫表皮的重要组成部分，参与昆虫表皮几丁质的降解，在昆虫的脱皮发育与生命活动中起着关键作用[2]。几丁质酶是能够降解几丁质的关键酶之一，昆虫的几丁质酶属于GH18家族的内切酶，主要存在于昆虫的体壁，脂肪体等组织，能够把几丁质水解成N-乙酰-D-氨基葡萄糖或寡聚物[1]。

蜜蜂球囊菌（Ascosphaera apis）是引起蜜蜂真菌传染病——白垩病（Chalkbrood disease）病原。昆虫病原真菌能通过分泌几丁质酶、蛋白酶等多种水解酶，来达到降解昆虫肠道围食膜和体壁几丁质保护层的作用。昆虫病原真菌超量表达几丁质酶和蛋白酶基因会提高菌株的毒力[3]。因此，对球囊菌几丁质酶基因进行鉴定和分析，将有助于了解几丁质酶在病原真菌入侵昆虫中的功能。

本研究对……