牛俊乐 黄斌政 潘彩娟 苏仕林 晋文金

摘 要：以紫果百香果幼嫩茎段作为试验材料，MS培养基作为基础培养基，进行外植体的诱导和培养，探究外植体适宜的灭菌方法，初代、继代及生根培養过程中适宜的激素种类及浓度。结果表明，75%的酒精灭菌30s+0.1%的升汞灭菌12min灭菌效果最好；初代培养以2.5mg/L的6-BA在芽的诱导中效果最好；继代培养以1.0mg/L的6-BA+0.3mg/L的IBA适宜芽的增殖且利于壮苗；生根培养以1/2 MS培养基为基础培养基，加入0.1mg/L的NAA+0.1mg/L的IBA形成的苗健壮，生根率高达100%。

关键词：百香果；组织培养；激素诱导

中图分类号 Q943.1 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2018）15-0024-03

百香果，又名爱情果，学名：西番莲（拉丁文名：Passiflora edulis Sims），包括黄色百香果、紫色百香果、紫红色百香果，属西番莲科西番莲属的草质藤本植物。百香果富含人体所需的17种氨基酸、多种维生素和类胡萝卜素以及各种微量元素，可溶性固形物15%～16%，总酸量3.8%～4.0%，甜酸适中，素有“果汁之王”的美称[1]。

百香果主要栽培地为广西、广东和福建等地，其繁殖方法主要有3种：一是用种子直接播种繁殖；二是用蔓条扦插繁殖；三是种子播种苗再嫁接高产无病毒母本。嫁接苗虽然稳产，但成本高；常年的种子繁殖，延长了劳作时间，增加不必要的成本；无选择的进行扦插压条繁殖，加快了品种的退化，且病害加剧；另外，扦插苗的寿命短于实生苗、分株苗、嫁接苗；扦插移栽苗的根系普遍较弱、生根浅，抗逆性弱，在移栽种植过程中，需要投入大量的人力和物力[2-3]。百香果的经济寿命为8～10年，作为经济作物在于稳产的同时还要有较长的经济寿命。而通过组织培养，可以在不受植物体其它部分干扰下研究被培养部分的生长和分化的规律，并且可以利用各种培养条件影响它们的生长和分化，以解决理论上和生产上的问题。

本研究通过对百香果的组织培养方法进行探究，目的是在短时间内培育出健康易成活的高质量的百香果种植苗，为百香果快繁提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验材料 供试材料为健壮紫果百香果嫩枝，采摘于百色市森林公园园圃内。采摘的外植体修剪感长度2cm左右有腋芽的茎段，备用。

1.2 培养条件 温度：（25±1）℃；光照度：2000lx、12h/d。

1.3 试验方法

1.3.1 外植体的灭菌 将外植体放入烧杯内，洗去污渍，加入适量洗衣粉，浸泡3～10min；用双层纱布封住烧杯口，用自来水流水冲洗1h后置于超净工作台内；用75%浓度的酒精灭菌10、20、30、40、50s，无菌水冲洗3次，再用0.05、0.1、0.15、0.2、0.25%浓度的升汞灭菌10min；无菌水冲洗3次[4]，接种，培养25～30d，分析结果，选出合适的酒精灭菌时间、升汞灭菌浓度组合，对选出的不同升汞灭菌浓度，依次灭菌6、7、8、9、10、11、12、13min，挑选出最佳灭菌时间。

1.3.2 初代培养 在超净工作台上将准备好的外植体接种到加入了浓度为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mg/L的KT和6-BA以及MS培养基中，25～30d后观察结果，记录分析。

1.3.3 继代培养 在初代培养后，以MS+0.5、1.0、1.5、2.0mg/L配合6-BA，0.1、0.2、0.3、0.4mg/L的IBA进行继代培养，接入无菌芽，培养25～30d后，记录分析。

1.3.4 生根诱导培养 挑选健康、粗壮、长势均匀长度2～3cm的增殖芽，将嫩芽从基部切下，接入0.05、0.1、0.15、0.2mg/L的NAA配合0.05、0.1、0.2mg/L的IBA的MS、1/2MS的培养基中培养进行壮苗生根培养，培养25～30d进行结果统计分析。

2 结果与分析

2.1 外植体灭菌处理 由表1可知，随着酒精灭菌时间的增加，外植体的污染率也随着降低，增加升汞浓度的同时，外植体的污染率也随着降低，成活率随着升高。但是，随着酒精灭菌时间增加，升汞浓度增加，外植体的成活率会随着降低，当酒精灭菌时间到50s，升汞浓度达到0.2%、0.25%时，外植体无污染，但外植体发黄、褐化死亡非常严重。结合表2可知：紫果百香果外植体的灭菌以75%的酒精30s+0.15%浓度的升汞灭菌12min效果最好。

2.2 初代芽诱导 由表3可知，外植体出芽率的高低受细胞分裂素浓度的影响，浓度低时，出芽率明显偏低，诱导效果不明显；随着浓度的提高，出芽率明显增加，但超过一定浓度后，芽的诱导率会呈下降趋势，并伴随着愈伤组织的形成。KT诱导出的芽颜色淡黄，弱小，不均匀。加入2.5mg/L的6-BA，诱导芽发生的效果最好，出芽率高，芽均匀健壮。

2.3 继代培养 从表4可以看出，高浓度的6-BA则会抑制芽的的增殖，随着6-BA的激素浓度量的递减，芽的增殖明显增加；6-BA浓度为1.0mg/L时，芽的增殖率最高；当6-BA的素浓度过低时，芽的诱导不均匀，芽出现两极分化，芽的长势比较弱；相同6-BA浓度下，加入浓度为0.3mg/L的IBA后，芽的增殖率和长势可以得到明显的改善，形成粗壮健康的芽体系。因此，继代培养以1.0mg/L的6-BA配合0.3mg/L IBA的效果最佳。

2.4 生根培养 从表5可以看出，芽的生根受NAA浓度的影响，随着NAA浓度的降低，根的诱导率增加，但浓度过低时，诱导效果会变差。相同NAA浓度下，加入IBA可以增强植株的长势，当加入0.1mg/L的IBA时，植株长势最好。对比MS、1/2MS培养基中植株的长势，1/2MS培养基中植株的长势要远远优于MS培养基。由此可知，在1/2MS培养基中加入0.1mg/L的NAA配合0.1mg/L的IBA，利于芽生根的诱导，同时能够起到很好的壮苗作用。

3 结论

研究结果表明，外植体在洗衣粉液中浸泡3～10min，经自来水冲洗1h，再用75%的酒精灭菌30s，0.15%的升汞灭菌12min，在不影响成活率的前提下，可以起到有效的灭菌效果。初代培养中，加入了2.5mg/L 6-BA，诱导芽的发生效果最好，出芽率高，芽均匀健壮；继代培养过程中，培养基内加入1.0mg/L 6-BA配合0.3mg/L IBA，利于芽的增殖，芽长势均匀、健壮。生根培养中，以1/2MS培养基作为基础培养基，加入0.1mg/L NAA配合0.1mg/L IBA，利于芽生根的诱导，诱导率高达100%。

参考文献

[1]张小平.百香果种植技术[J].农村实用技术，2014（5）：20-21.

[2]杨冬业，张丽珍，徐淑庆.百香果组织培养及植株再生[J].北方园艺，201（3）：125-127.

[3]杨冬业，张丽珍.百香果的扦插种植研究[J].北方园艺，2015，9：38-40.

[4]蔡蕊，徐民泽，段浩楠，等.紫色甘薯试管苗稳定高效快繁技术研究[J].广东农业科学，2012（22）：16-18.

（责编：张宏民）