骆延波 商延 胡明 赵敏 杨胜福 李璐璐 齐静 张印 张庆 刘玉庆

摘要：为了解博落回提取物（含血根碱1.50%，白屈菜红碱0.75%）对仔猪细菌抗药性的影响，本试验通过在30日龄仔猪的饮水中分别添加博落回提取物和阿莫西林，并用96点阵二倍稀释法测定9种常用抗生素对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC），评价其防止仔猪腹泻、促进仔猪生长以及对细菌抗药性的影响。结果表明，添加博落回提取物的试验组对细菌抗药性以及仔猪腹泻率、成活率、出栏重等生产性能指标的影响与添加阿莫西林的对照组之間差异不显著，基于上述结果，博落回提取物可替代阿莫西林用于预防仔猪腹泻，提高仔猪成活率和促生长。

关键词：博落回提取物；阿莫西林；干预；细菌抗药性；仔猪

中图分类号：S853.7文献标识号：A文章编号：1001-4942（2018）07-0020-07

Abstract In order to investigate the effects of extracts of Macleaya cordata （containing 1.5% sanguinarine and 0.75% chelerythrine） on bacterial resistance， the experiment was carried out by adding the extracts and amoxicillin into drinking water of 30-day-old piglets repectively. The MIC values of nine common antibiotics to Escherichia coli and Staphylococcus aureus were determined by 96 dot matrix double dilution method to evaluate their effects on the prevention of diarrhea， growth promotion and the level of resistance of bacteria. The results showed that the inhibitory effect of extracts of Macleaya cordata on the drug resistance of bacteria was very small. There was no significant difference between the experimental group and the control group in the diarrhea rate， survival rate and slaughter weight. Based on the above results， the extracts of Macleaya cordata can replace amoxicillin for the prevention of piglet diarrhea and improve the survival rate and growth of piglets.

Keywords Extract of Macleaya cordata； Amoxicillin； Intervention； Bacterial resistance； Piglet

随着抗生素的广泛大量使用导致严重的多重抗药性和药物残留，全球范围内抗生素的从严处方化管理和抗药性监测渐成常规[1，2]。另一方面，由于安全有效的新抗生素研发越来越困难，抗生素成为全球共有的稀缺珍贵资源，寻找新抑菌物质和抗生素替代品也成为抗感染的趋势。中国有中药资源优势和使用经验，在此方面取得了突出成就[3-5]。博落回 （Macleaya cordata）系罂粟科博落回属大型草本植物，具有抑菌、杀虫、抗肿瘤等多种生物活性，临床上主要用于治疗指疔、脓肿及一些恶疮和皮肤病等[6]。博落回果实及全草中含有丰富的异喹啉类生物碱，主要有血根碱（sanguinarine）、白屈菜红碱（chelerythrine）、原阿片碱（protopine）、别隐品碱（allocryptopine）等[7，8]。博落回全碱有局部麻醉作用，大剂量口服对心脏及神经系统有毒害作用[9]，但提纯的Sangrovit（博落回制剂），主要含1.50%血根碱与 0.75%白屈菜红碱，安全性大大提高，100～600 mg/kg对猪、鸡服用都是安全的，其在欧洲已经广泛用于替代抗生素作为药物添加剂[10，11]。血根碱与白屈菜红碱可以相互转化，血根碱能抑制细菌色氨酸脱羧酶活性，阻止色氨酸脱羧产生吲哚及吲哚类粪臭素，促使色氨酸用于蛋白质合成，具有抑菌、消炎、除臭、促生长的作用[10]。

阿莫西林为半合成青霉素类广谱β-内酰胺类抗生素，在酸性条件下稳定，胃肠道吸收率达90%。阿莫西林杀菌作用强，穿透细胞膜的能力也强，是目前兽医临床上使用较广的抗生素，且多使用阿莫西林可溶性粉，本试验即以其为对照采用微量肉汤稀释法和琼脂平板法，参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）药敏标准检测方法，研究血根碱对干预后仔猪肠道菌群抗药性的影响，以期为博落回提取物代替抗生素用作饲料添加剂的可行性提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物

30日龄大长白三元杂交商品仔猪450头。

1.2 试验药物与培养基

博落回提取物血根碱（批号20160204，含量92%），阿莫西林可溶性粉（批号20160501，规格10%）。药物有多西环素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、庆大霉素、头孢曲松、头孢噻肟、氨苄西林、左旋氧氟沙星和环丙沙星。培养基有大肠杆菌显色培养基、沙门氏菌显色培养基、高盐培养基。

1.3 试验时间与地点

2016年8月1日至9月2日于山东省诸城市某家庭农场内进行试验。

1.4 试验方法

将试验仔猪分为2组， 150头作为试验组，饮水中添加血根碱；300头作为对照组，饮水中添加阿莫西林。在试验前和试验结束时，分别采集各组仔猪新鲜粪便，分离鉴定大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，测定9种抗生素（多环西素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、庆大霉素、头孢曲松、头孢噻肟、氨苄西林、左旋氧氟沙星、环丙沙星）的最小抑菌浓度（MIC），对比细菌抗药性的变化情况。

试验过程中记录试验组和对照组猪死亡只数、腹泻只数，试验结束时分别统计两组的猪死亡只数、腹泻只数和只出栏体重（kg），计算腹泻率（%）、成活率（%）和平均出栏重（kg）。

1.5 数据处理

采用Microsoft Excel 2007和SPSS 18.0软件进行数据整理分析与差异显著性检验。

2 结果与分析

2.1 分离鉴定细菌

试验开始前，从试验组分离到大肠杆菌38株，金黄色葡萄球菌12株；对照组分离到大肠杆菌40株，金黄色葡萄球菌18株。试验结束时，从试验组分离到大肠杆菌38株，金黄色葡萄球菌12株；对照组分离到大肠杆菌38株，金黄色葡萄球菌18株。

2.2 细菌抗药性检测结果

从图1可以看出，干预前后试验组大肠杆菌对多西环素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、环丙沙星抗药性水平基本上没有变化，而对头孢曲松、头孢噻肟、庆大霉素、氨苄西林、左旋氧氟沙星的抗药性水平下降，但差异不显著（P>0.05）。

从图2可以看出，干预前后对照組大肠杆菌对多西环素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、头孢曲松、头孢噻肟、氨苄西林、左旋氧氟沙星、环丙沙星抗药性水平基本上没变化，而对庆大霉素的抗药性水平下降，但差异不显著（P>0.05）。

从图3可以看出，干预前后试验组金黄色葡萄球菌对多西环素、丁胺卡那霉素、庆大霉素、头孢曲松、头孢噻肟、氨苄西林、左旋氧氟沙星抗药性水平均未有明显变化，而对氟苯尼考、环丙沙星的抗药性水平略有下降，但差异不显著（P>0.05）。

从图4可以看出，干预前后对照组金黄色葡萄球菌对多西环素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、庆大霉素、头孢曲松、头孢噻肟、左旋氧氟沙星、环丙沙星抗药性水平均未有明显变化，而对氨苄西林的抗药性水平略有下降，但差异不显著（P>0.05）。

2.3 生产性能试验结果

从表2可以看出，试验组各项生产性能指标与对照组无显著差别，说明博落回提取物在干预商品猪生产方面与阿莫西林效果相当。

3 讨论与结论

试验期间，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均对常用的9种抗生素产生抗药性。试验组与对照组中细菌的MIC值均未发生显著变化，与相关的研究结果一致[12，13]，这可能与干预时间较短有关。因为细菌抗药性发生显著变化，需要在一定的抗生素浓度作用下经过一定的时间才能发生[14，15]。

干预试验前，从试验组分离到大肠杆菌38株，金黄色葡萄球菌12株；对照组分离到大肠杆菌40株，金黄色葡萄球菌18株。干预试验后，从试验组分离到大肠杆菌38株，金黄色葡萄球菌12株；对照组分离到大肠杆菌38株，金黄色葡萄球菌18株。试验组与对照组在干预试验前后细菌分离情况基本一致。

根据药敏检测结果，多西环素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、庆大霉素、头孢曲松、头孢噻肟、氨苄西林、左旋氧氟沙星、环丙沙星9种常用抗生素对博落回提取物血根碱和阿莫西林2组分离到的大肠杆菌杆菌、金黄色葡萄球的MIC值未发生明显变化。同时，博落回提取物血根碱与阿莫西林效果相当，能够提高仔猪的生产性能，有效减少仔猪腹泻率，提高仔猪成活率，促进生长。这为博落回提取物代替抗生素用作饲料添加剂提供参考依据。

参 考 文 献：

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