许 朋，郑春辉，孙智勇，余 兰，冯 昆*

(1.遵义医学院 药学院,贵州 遵义 563099;2. 中药基础与应用研究重点实验室, 遵义医学院 珠海校区，广东 珠海 519000)

随着分子生物学和医学技术的快速进步，分离技术正朝着简便快捷、高质量、高纯度、高通量方向发展，以满足大样本、高质量的实验要求。近年来磁性纳米材料在核酸分离领域越来越受瞩目，其具有比表面积大、稳定性好、多种表面官能团修饰等优点[1]，此外，磁珠颗粒的固相提取方法大大简化了核酸的提取流程，基于此已经广泛应用[2-5]。目前市面上所销售基于磁性分离技术的核酸分离试剂盒等商品，绝大多数为国外产品，这类试剂盒价格昂贵，很难得到广泛应用。据此，本实验针对提取基因组DNA，通过对分离流程改进和试剂体系开发，对不同提取条件和步骤进行了量化比较和条件优化，同时比较了市售类似产品，建立了快速提取基因组DNA的方法和试剂体系；对影响DNA提取效率的各个因素以及DNA与磁珠的结合情况分析与探讨，建立了一种快速提取基因组DNA的磁性分离技术。

1 材料与方法

1.1 材料

小鼠肺组织[SPF级小鼠，品系：CD-1©(ICR) IGS Mice，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2011- 0011]，二氧化硅包覆磁性纳米微球(河南惠尔生物科技有限公司)

1.2 试剂

蛋白酶K、溶菌酶、盐酸胍(Gu-HCl)及琼脂糖(均购于Sigma公司)；核酸染料GlodView(北京索莱宝生物)；DNA Marker DL2000及上样缓冲液(均购于大连宝生物)；EDTA、SDS、Triton-100、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸钾、氯化锂及MOPS(均为分析纯，购于麦克林公司)；……