崔 沛，王东方，闫若潜，王淑娟，冉晓龙，班付国

（河南省动物疫病预防控制中心，河南郑州 450008）

副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis，HPS）是猪上呼吸道中常在的一种机会致病菌，在特定条件下能够侵入机体，引发以纤维素性多发性关节炎、脑膜炎和浆膜炎为主要特征的全身性疫病[1]，是目前影响养猪业最严重的病原之一。HPS在环境中普遍存在，只感染猪[2]，可影响2周龄至4月龄的青年猪，主要在断奶后和保育阶段发病，通常见于5～8周龄猪群，发病率一般在10%～15%之间，严重时死亡率可达50%[3]。HPS还常由猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病病毒和猪呼吸道冠状病毒等引起继发感染[4]。

近几年，HPS感染使许多大规模猪场的经济效益受到较大冲击[5]。因此，建立一种快速、敏感、特异的HPS检测诊断方法尤为重要。根据临床症状、剖检病变进行细菌分离鉴定是HPS的经典诊断方法。然而该菌培养条件苛刻，很难从患病动物中分离到，尤其是经抗生素治疗后，其分离更加困难复杂[6]。目前，用于检测HPS抗体的方法有补体结合试验、间接血凝试验和酶联免疫吸附试验。但血清学检测存在操作麻烦、检测周期长、敏感性和特异性低等不足。随着分子生物学研究的不断深入，PCR诊断技术已广泛用于各个领域。张盼锋等[7]、万世平等[8]建立了HPS PCR检测方法，但常规PCR方法只能定性，并且敏感性有待提高。随着荧光定量PCR技术的快速发展，该技术开始被广泛用于动物疫病检测。该技术灵敏度比普通PCR提高了100倍，并能减少假阳性概率，而且由于不用电泳，减少了污染，节省了时间，使检测结果更为直观[6]。……