黎 露，韩涛涛，吴思雯，唐青海，杨 海，何丽芳，刘 最，王芳宇，张 倩

（衡阳师范学院生命科学与环境学院生物技术重点实验室，湖南衡阳 421008）

伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）感染引起的多种家畜的急性传染病，1周龄内仔猪易感，多出现发热、奇痒、昏睡、共济失调等神经症状，妊娠母猪后期感染可发生流产，产死胎，甚至木乃伊胎[1]。以往，育肥猪感染一般不发生死亡，仅出现增重减慢、体温升高等轻微症状[2-3]。近年来，研究发现，PRV对育肥猪的致病性显著增强，并以呼吸道和发育障碍为主要症状[4]，但仅靠临床诊断，无法确诊PRV感染，需要借助实验室诊断。

目前，PR主要依靠接种商品化的减毒活疫苗和基因缺失疫苗进行预防。PRV核酸为双链 DNA，其编码的gE蛋白是一种重要的神经毒性因子，在基因缺失疫苗毒株中，该基因通常被剔除[5-6]。因此，在实验室诊断中，通常采用PCR检测gE基因，以区分野毒和疫苗毒，亦可配合gE蛋白特异性抗体检测进行鉴别诊断[7-8]。2017年4月衡阳市某猪场育肥猪发生疑似PR疫情。为确诊疫情，采集发病猪脾脏进行了实验室诊断。

1 材料与方法

1.1 材料

Vero细胞：衡阳师范学院生命科学与环境学院生物技术重点实验室培养保存；PRV强毒株阳性对照和PRV阳性血清：衡阳师范学院生命科学与环境学院生物技术重点实验室制备保存；血液/细胞/组织DNA提取试剂盒：购自天根生化科技（北京）有限公司；胎牛血清：购自Gibico公司；MEM培养基：购自北京清大天一科技有限公司；Premix Ex Taq酶：购自宝生物工程（大连）有限公司；……