张艳丽 杨卫 武丽 李福建 张贵贤

1保定市传染病医院结核科（河北保定 071000）；2保定市第一中心医院呼吸科（河北保定 071000）

结核病（tuberculosis，TB）每年导致860万新病例和170万人死亡［1］。表达IFN⁃γ的Th1细胞和产生IL⁃17的Th17细胞在控制结核感染中起关键作用。最近，髓系来源的抑制性细胞（MDSC）与T细胞反应的不平衡相关并参与TB的疾病进展。MDSC具有抑制T细胞应答的强大能力。MDSCs可分为两类：显示CD14⁃CD15+CD11b+CD33+HLA⁃DRlow/-表型的粒细胞MDSCs和具有CD14+CD15⁃CD11b+CD33+HLA⁃DRlow/-表达的单核细胞MDSCs［2］。高度抑制的MDSC通过细胞—细胞相互作用发挥其功能，包括共刺激/抑制分子如B7⁃H1（PD⁃L1）、B7⁃H3［3］、CD40和CD80。在IFN⁃γ存在的情况下通过GM⁃csf和IL⁃6体外产生人CD33+MDSC可用作鉴定IFN⁃γ的功能。

1 对象与方法

1.1 研究对象活动性肺结核（LTBI）患者120例，LTBI患者80例，健康体检者40例。所有参与者都是成年人，不包括孕妇和儿童。肺结核的诊断基于阳性痰涂片和（或）培养结果和胸片。对于细菌培养结果阴性的患者，通过胸片、临床症状确诊，经抗结核化疗后症状改善和影像学改善。健康人从本院进行健康体检随机抽取。健康个体筛选标准：（1）无发热，咳嗽或其他活动性结核体征；（2）体格检查结果正常，X线正常；（3）TST检查，T⁃SPOT阴性。排除标准：恶性肿瘤，HIV感染或摄入免疫抑制剂的个体。

1.2 体外产生人类MDSC通过聚蔗糖梯度离心从健康个体分离PBMC，并在含有10%FBS（Sigma Aldrich，Munich，Germany），2 mmol谷氨酰胺，100 IU/mL青霉素和100 mg/mL链霉素的RPMI⁃1640培养基。为了产生功能性MDSC，在重组人细胞因子GM⁃csf，IL⁃6（10 ng/mL）和 IFN⁃γ（10 ng/mL）（R&D Systems，Minneapolis，MN，USA）的存在下，在完全培养基中以5×105个细胞/mL在T⁃25烧瓶中培养PBMC 7 d。用单独培养基和单核细胞培养的PBMC［通过磁性活化细胞分选抗CD14微珠（BD Pharmingen）分离］用作对照。培养操作重复运行。……