姜美燕

【中图分类号】R446.61 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2018）06--01

乙型肝炎（乙肝）是一种临床常见的慢性传染病，最近的流行病学调查研究显示，我国乙肝的发病率一直居高不下，且有一定的上升趋势，因此加强对乙肝的诊治和预防意义重大，其中检测乙肝病毒是一个重要环节[1]。磁微粒化学发光法是临床上检测乙肝五项指标的常用方法，其可以直接反映人体对乙肝病毒的免疫反应状态，但无法直接反映乙肝病毒在人体内的复制情况[2]，实时PCR能检测患者血清中乙肝病毒DNA的含量，从而直接反映患者血液中乙肝病毒载量[3]。本研究旨在探讨实时PCR检测乙肝DNA与磁微粒化学发光法检测乙肝五项的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选择2015年10月至2017年10月到我院就诊的192例乙肝患者作为研究对象，其中男118例，女74例，年龄19-67 岁，平均年龄（40.4±11.2）岁，病程为 4个月-23 年，平均病程（8.9±2.3）年。

1.2 研究方法

1.2.1 样本采集 采集患者晨空腹静脉血2mL，3000rpm离心10min，分离血清，将其平均分为两份，-80℃保存待测，一份用于磁微粒化学发光法检测乙肝五项，一份用于实时PCR检测乙肝病毒DNA 含量。

1.2.2 磁微粒化学发光法 严格按照郑州安图生物工程有限公司生产的乙肝五项检测试剂盒操作步骤检测患乙肝者血清中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb水平。

1.2.3 实时PCR法 采用磁珠法提取患者血清中乙肝病毒DNA，使用罗氏Cobas z 480全自动荧光PCR分析仪扩增乙肝病毒DNA，PCR反应条件：93℃ 2min→1个循环，93℃ 45s→55℃60s→10个循环，93℃ 30s→55℃ 45 s→30个循环，40℃ 20s→1个循环，乙肝DNA检测试剂盒购自中山大学达安基因有限公司。在反应结束后，采用实时PCR专用自动分析软件统计乙肝病毒DNA含量。

1.3 统计学分析

所有实验数据采用SPSS18.0软件进行分析，计数资料组间差异用x2检验，计量资料采用（）表示，组间比较采用t检验，当P<0.05时认为差异有统计学意义。

2 结果

按照所有患者血清样本肝五项指标的检测结果可分为五组，其中第1组[HBsAg（+）、HBeAg（+）、HBcAb（+）]和第4组[HBsAg（+）、HBeAg（+）]患者的乙肝病毒DNA阳性率显著高于其他四組（P<0.05）；第1组的乙肝五项模式[HBsAg（+）、HBeAg（+）、HBcAb（+）]临床上称之为“大三阳”，该组患者血清乙肝病毒DNA 拷贝数显著高于其他四组（P<0.05）；第2 组的乙肝五项模式[HBsAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）]临床上称之为“小三阳”，该组患者的血清乙肝病毒DNA 检出阳性率显著低于要远低于第1组，而乙肝病毒DNA拷贝数与第1组相比无显著性差异（P>0.05）；第5 组[HBsAg（+）]患者均未检出乙肝病毒DNA。

3 讨论

在我国传染病发病率中，乙型肝炎的感染率一直较高，最近的流行病学报道显示，我国HBsAg阳性率在8.1-12.3%之间，一般乙肝病毒感染者易发展成慢性肝炎，严重者甚至会发展为肝硬化、肝癌等疾病，而严重影响患者的生活质量[4]，因此，选择准确有效的检测方法对乙肝患者的早期诊断、及时治疗，以及减少乙肝的传播意义重大。

磁微粒化学发光法是将磁性分离技术、化学发光技术、免疫分析技术三者结合起来的一种新兴分析方法，临床上可用于检测乙肝五项指标，该方法具有灵敏度高、特异性强、操作快捷等优点，其可以直接反映人体对乙肝病毒的免疫反应状态，然而，这种方法无法直接反映乙肝病毒在人体内的复制情况[5]。实时PCR可以直接检测出患者血清中乙肝病毒DNA的含量，及时、动态的反映患者血液中乙肝病毒载量，并为乙肝病毒的传染性评价提供参考依据[6]。本研究结果发现，第1组 [HBsAg（+）、HBeAg（+）、HBcAb（+），“大三阳”]患者血清乙肝病毒DNA阳性率和乙肝病毒DNA拷贝数均较高（P<0.05）；第2 组 [HBsAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+），“小三阳”]患者的血清乙肝病毒DNA 检出阳性率显著低于要远低于第1组，但乙肝病毒DNA拷贝数与第1组相比无显著性差异（P>0.05），这提示实时PCR检测乙肝DNA含量联合磁微粒化学发光法检测乙肝五项对提高乙型肝炎的准确诊断具有重要的应用价值。

参考文献

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邓俊.两种方法检测乙型肝炎病毒的对比分析[J].检验医学与临床，2013，10（3）：303-304.

姚兆基.实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA和乙肝病毒标志物的价值[J].内蒙古医学杂志，2017，49（4）：485-486.

曹亦菲，何平，谭晓华.1012例乙肝病毒患者HBV P区基因位点变异分析[J].健康研究，2011，31（1）：17-20.

朱小燕，黎兴盛，李智珍，等.磁微粒化学发光法在术前四项定量检测中的应用价值[J].实验与检验医学，2015（6）：767-769.

王碧玉，黄燕妮.乙肝两对半定量、乙肝DNA定量与乙肝前S1抗原联合检测的临床意义[J].海南医学，2016，27（7）：1182-1184.