丹酚酸C对MPP+损伤的SH-SY5Y细胞氧化应激和凋亡的抑制作用
2018-08-21宋俊科杨海光周启蒙王金华杜冠华
宋俊科,张 雯,张 雪,杨海光,周启蒙,王金华,杜冠华
(中国医学科学院&北京协和医学院药物研究所,天然药物活性物质与功能国家重点实验室,药物靶点研究与新药筛选北京市重点实验室,北京 100050)
帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种多发于老年人、以黑质多巴胺神经元慢性进行性死亡为主要特征的神经退行性疾病[1-2]。流行病学调查显示,65岁以上人群PD患病率达到2%~3%,并且随着老龄化社会的到来,PD患者的数量将迅速增加[3-5]。目前,对PD发病机制认识不足,尚无有效的治疗手段。越来越多的证据显示,线粒体功能障碍与氧化应激等相互作用,在PD神经元选择性死亡过程中发挥重要作用[6-9]。
据报道,丹酚酸类化合物在抑制氧化应激与细胞凋亡方面有着非常显著的作用。丹酚酸B(salvi⁃anolic acid B,Sal B)能够逆转6-羟基多巴胺和1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridi⁃num ion,MPP+)造成的SH-SY5Y细胞调亡[10-13],Sal A能够抑制H2O2诱导的SH-SY5Y细胞损伤[14]。Sal C与Sal A和Sal B具有较为相似的结构。有研究表明,Sal C对基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9的活性均具有明显的抑制作用[15],同时Sal C能够降低单侧输尿管梗阻大鼠肾CCL5和CXCL10炎症因子的分泌[16]。然而到目前为止,尚无关于Sal C神经保护作用方面的报道。考虑到Sal A和Sal B作为Sal C的类似物具有较好的抗MPP+损伤或神经细胞保护作用,本研究选择SH-SY5Y细胞为研究对象,采用MPP+诱导SHSY5Y细胞损伤模型研究Sal C对SH-SY5Y细胞的保护作用。
1 材料与方法
1.1 药物、试剂和主要仪器
Sal C购自中国源叶生物科技有限公司。DMEM/F12培养基、胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、线粒体超氧化物指示剂(mitochondrial super⁃oxide indicator,MitoSOX)和2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diace⁃tate,DCFH-DA)均购自美国Thermo scientific公司;……
