王新钊, 马丽娟, 孙淑君, 缪应业

解放军第152医院 1.消化内科； 2.肿瘤科； 3.临床实验室，河南 平顶山 467000

胃癌是全球性恶性肿瘤，发病率和死亡率较高，危害着人类的健康[1-2]。目前，胃癌的主要治疗方式是手术，但是已发生转移和预后不良仍造成胃癌患者的死亡率居高不下。肿瘤的发生、发展和转移是一个复杂的过程。近年来，临床上采用抗癌药物治疗各类肿瘤的作用越来越受到重视。乌司他丁是一种尿胰蛋白酶抑制剂，对多种蛋白酶的活性具有抑制作用，进而发挥抑制肿瘤生长和恶化的作用。研究[3-4]发现，乌司他丁主要通过作用于纤维蛋白酶激活因子、基质蛋白酶、血管内皮因子等，从而抑制肿瘤的生长和转移。目前国内关于乌司他丁对胃癌的作用机制研究较少。本研究采用了不同浓度的乌司他丁作用于体外培养的人胃癌MKN-45细胞，探讨乌司他丁对MKN-45细胞增殖、凋亡、侵袭的影响，以及对NF-κB信号通路的影响，以期为临床治疗胃癌提供新的理论基础。

1 材料与方法

1.1实验材料人胃癌细胞系MKN-45购自美国ATCC，乌司他丁购自广东天普生化有限公司。DMEM培养基、胎牛血清购自美国Gibco公司，胰酶(含EDTA)购自美国Hyelone公司，Matrigel胶购自美国BD公司，四甲基偶氮唑(MTT)细胞增殖检测试剂盒、二甲基亚砜(Dimethyl sulphoxide, DMSO)、膜联蛋白 V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(propidium iodide, PI)细胞凋亡检测试剂盒购自美国Sigma公司，Transwell小室购自美国Corning公司，聚偏二氟乙烯(polyvinylidene fluoride, PVDF)膜购自美国Pierce公司，β肌动蛋白(β-actin)抗体、核因子-κB(nuclear factor kappa B, NF-κB)抗体、辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔抗体购自美国Abcam公司，B细……