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Notch信号通路在咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型中的表达

2018-08-20王小康林向飞朱晓芳

中国麻风皮肤病杂志 2018年8期
关键词:小鼠模型

潘 敏 王小康 赵 莎 林向飞 朱晓芳

银屑病(psoriasis)是一种常见的慢性炎症性疾病,典型表现为身体多处皮肤表面的鳞屑样红斑。在欧洲和美国,发病率接近2%,其他地区相对较少。2010年中国六省市银屑病流行病学调查研究发现中国人患病率为0.47%。在银屑病发病机制研究中发现T淋巴细胞活化及信号转导是银屑病发病机制中的关键环节,对于银屑病的发生和发展起着重要作用[1-3]。研究表明,在银屑病相关的信号通路中,Notch信号通路与角质形成细胞的增殖和凋亡与银屑病发生关系密切,其中受体Notch1-4、配体Jagged-1、目标基因Hes1均为Notch信号通路的关键信号分子[4-6]。本研究通过建立咪喹莫特(imiquimod,IMQ)诱导的银屑病小鼠模型,观测Notch1、Notch2、配体Jagged-1、目标基因Hes-1等在模型小鼠皮损和对照组小鼠皮损中的表达水平,从而进一步明确Notch信号通路在银屑病发病机制中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 雌性BALB/c小鼠,6~8周龄,购买于扬州大学比较医学中心,饲养于SPF级动物室。

1.1.2 试剂及仪器 凡士林乳膏(南昌白云药业有限公司),5%咪喹莫特乳膏(四川明欣药业有限责任公司),薇婷护肤脱毛膏[利沾时家化(中国)有限公司],抗Notch1-2、Jagged-1及Hes-1蛋白单克隆抗体(美国Abcam公司),通用型二抗及抗体稀释液(美国Abcam公司);Trizol RNA提取试剂((北京BioTeke公司);iScript cDNA kit逆转录试剂盒(美国BioRad公司);iTaqTMSYBR-Green Real Time PCR试剂盒(美国ABI公司);DAB试剂盒(北京中衫金桥生物有限公司);显微镜(OLYMPUS BX43)。

1.2 方法

1.2.1 动物模型建立 取BALB/c小鼠30只,随机分为IMQ模型组20只和空白对照组10只,用戊巴比妥钠80 mg/kg腹腔注射麻醉,小心剃去小鼠背部中央区域的被毛,温和型脱毛膏脱去毳毛,形成约2 cm×3 cm暴露区域。……

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