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鸭肠炎病毒疫苗株EvaGreen实时荧光定量PCR方法的建立

2018-08-07万春和刘荣昌程龙飞傅光华施少华陈红梅傅秋玲

畜牧兽医学报 2018年7期
关键词:检测方法

万春和,刘荣昌,程龙飞,傅光华,施少华,陈红梅,傅秋玲,黄 瑜

(福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心/福建省禽病防治重点实验室,福州 350013)

鸭病毒性肠炎(duck virus enteritis, DVE)又称鸭瘟(duck plague, DP),是由鸭肠炎病毒(duck enteritis virus, DEV)引起的常见于鸭、鹅及其他雁形目禽类的一种急性、高度接触性传染病[1]。国际病毒分类委员会(The International Committee on Taxonomy of Viruses,ICTV)2011年基于DEV相关研究将其命名为Anatid alphaherpesvirus 1(鸭疱疹病毒1型)。根据ICTV的分类方法,鸭疱疹病毒1型属于疱疹病毒科(Herpesviridae)、α-疱疹病毒亚科(Alphaherpesviridae)、马立克病毒属(Mardivirus)[2]。

疱疹病毒基因组庞大,复制非必需区多,可容纳多个外源基因的插入,具有良好的开发基因工程活载体多联疫苗前景,已见有马立克病毒(Marek’s disease virus,MDV)[3]、火鸡疱疹病毒(herpesvirus of turkey,HVT)[4]、伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)[5]及传染性喉气管炎病毒(avian infectious laryngotracheitis virus,ILTV)[6]作为基因工程活载体疫苗的相关研究报道。免疫鸭瘟弱毒疫苗是控制鸭瘟的有效措施,该疫苗株是将DEV鸭胚适应株在鸡胚连续传60余代选育而成[7]。DEV弱毒疫苗在我国用于防控DEV超过50余年,该疫苗生产技术成熟、安全无副作用、诱导抗体产生快、免疫保护效果好。此外,DEV弱毒疫苗具有良好的鸡胚适应性,便于后续疫苗标准化生产,已成为水禽疫病活载体疫苗研究开发热点[8-9]。基于DEV弱毒疫苗株作为活载体来开发针对H5N1亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)血凝素基因(HA)的活载体疫苗(rDEV-H5HA)可抵抗H5AIV和DEV强毒攻击[10];针对禽坦布苏病毒(avian Tembusu virus,ATmV)E蛋白和PrM蛋白的活载体疫苗(rDEV-PrM/TE)可抵抗ATmV和DEV强毒攻击[11];针对鸭甲肝病毒1型和3型(DHAV-1和DHAV-3)结构蛋白VP1的活载体疫苗(rDEV-2VP1)接种可迅速激发机体体液免疫和细胞免疫,3 d 后可完全抵抗DHAV-1、DHAV-3和DEV强毒攻击[12],在多联禽用(尤其是水禽)活疫苗研发方面应用前景广阔。……

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