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利用酵母随机展示技术对猪肺炎支原体P97上B细胞表位的筛选和鉴定

2018-08-07朱可蒙辛九庆刘玉芬刘恒贵

畜牧兽医学报 2018年7期

刘 璐,郭 杰,朱可蒙,王 宁,辛九庆,刘玉芬*,刘恒贵*

(1.哈尔滨师范大学生命科学与技术学院,哈尔滨 150025;2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体团队,哈尔滨 150069)

猪肺炎支原体(Mycoplasmahyopneumoniae,Mhp)是一种广泛流行的只感染猪的支原体,能够引起猪慢性肺炎,导致体重增长缓慢和食物转化率下降,对猪规模化饲养具有重要的影响[1]。Mhp引起猪支原体肺炎的第一步是特异性黏附到呼吸道黏膜上皮细胞表面,导致纤毛摆动停滞、脱落和上皮细胞破损,然后激发宿主炎症反应,使猪易于继发其他病原体的感染。Mhp对纤毛上皮细胞的黏附是引发感染的先决条件。张启敬等[2]首次利用制备的单克隆抗体F1B6和F2G5发现了Mhp的膜蛋白P97,他们进一步试验发现这些单抗结合P97后,猪肺炎支原体就失去了对纤毛的黏附能力,因此,P97是Mhp膜上的一种黏附蛋白,并且在支原体感染过程中发挥着重要的功能。有研究表明,P97是猪肺炎支原体最主要的抗原蛋白之一,它在Mhp感染时引发的免疫反应要早于其他抗原蛋白,诱导机体产生的特异性IgA和IgM抗体比其他抗原的抗体要早35~60 d[3],并证实纤毛和阻断黏附抗体的结合位点位于P97 C端的重复序列[4-5]。近些年,有许多研究者对P97或其R1区进行了表达,验证了其具有良好的免疫原性[6]。

B细胞表位是位于蛋白质抗原上的抗体识别的最小多肽序列,目前,已有大量利用P97的免疫原性特点在疫苗及诊断方面的研究报道[7-13],然而,对该蛋白上B细胞表位的探索却几乎是一片空白。……

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