两株H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白中和性单克隆抗体的制备及抗病毒活性研究
2018-08-07梁文花贾云慧许程志吴运谱杨焕良乔传玲陈化兰
梁文花,贾云慧,许程志,吴运谱,陈 艳,杨焕良,乔传玲,陈化兰
(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室 农业部动物流感重点开放实验室,哈尔滨 150069)
猪流感(swine influenza, SI)是由猪流感病毒(swine influenza virus, SIV)引起的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。猪群中广泛流行的SIV主要有3种亚型H1N1、H1N2和H3N2,其中H1N1病毒又分为经典型、类人型、类禽型和2009/H1N1 4个基因谱系[1]。类禽型H1N1流感在20世纪70年代末首次出现于欧洲猪群,病原是由感染禽类传播到猪群中之后广泛流行[2],目前该类病毒在欧洲及亚洲多个国家的猪群中广泛流行,被称之为欧亚类禽型(Eurasian avian-like,EA)H1N1 SIV[3-4],并且出现了感染人的零星报道[5-6]。本实验室在2005年分离到第一株EA H1N1(A/swine/Henan/11/2005),近10多年 SI的病原学监测结果发现EA H1N1已逐步成为主要的流行毒株,部分毒株已具备了在哺乳动物间高效传播的能力[7],大大凸显了EA H1N1病毒重要的兽医学及公共卫生学意义。
作为流感病毒重要的膜蛋白之一,血凝素(hemagglutinin,HA)具有与细胞表面病毒特异性受体结合、介导病毒外膜与细胞内体融合,以及刺激机体产生中和抗体等作用[8-9]。HA蛋白诱导机体产生的中和抗体作为抗病毒免疫的首要因素,能够在第一时间与病毒结合,从而抑制病毒对细胞的入侵,在抗病毒治疗及其免疫等方面都发挥着重要作用[10]。已有研究结果表明中和性单克隆抗体(monoclonal antibody, MAb)作为一种有效的技术手段可用于防制流感病毒感染的发生[11]。因此,本研究以纯化的全病毒蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术筛选制备针对HA蛋白的、具有中和活性的MAb,并对其体内外中和病毒感染的活性进行了检测与分析。……
