古彩红，潘勇权，陈思琦，彭敏文

(惠州市第三人民医院病理科，广东 惠州 516002)

胸水在临床中较为常见，其产生机制较为复杂，快速、准确对其良恶性进行判断，可为疾病治疗提供重要参考。在胸水的细胞病理学诊断中，对细胞性质与来源予以明确[1]，是临床研究重点。本研究为进一步探寻胸水诊断的有效方法，对免疫组化联合沉渣包埋切片检测在胸水诊断中的应用价值予以分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2015年5月至2017年3月惠州市第三人民医院收治的可疑恶性胸水标本41例，男17例，女24例；年龄27～78岁，平均年龄(59.32±3.67)岁；体质量43～71 kg，平均体质量(54.25±3.16)kg；5例为右侧胸水，6例为左侧胸水，30例为双侧胸水；20例胸水原因待查，21例有明确器官占位；13例为血性胸水；28例为淡黄色胸水。

1.2 检测方法

所有标本进行液基细胞学检测，然后行沉渣包埋切片联合免疫组化检测，最终结果均经病理组织学及影像学明确诊断。

1)液基细胞学检测。取胸水50 mL置于4 ℃冰箱内，沉降30 min后，将上清液去除，以2000 r·min-1速度离心10 min后，将沉淀物置入液基保存瓶中，室温下放置20 min。沉淀物梯度离心后放入TIB-1800型全自动液基薄层细胞制片机内，自动制成细胞薄片，采用二甲苯透明、湿封，以光镜予以观察。

2)沉渣包埋切片。胸水标本室温下放置30 min，分离上清液，余下标本以3000 r·min-1速度离心10 min后分离上清液，加入95%乙醇10 mL，再以2000 r·min-1速度离心10 min，滤纸包封沉渣，置入10%中性福尔马林固定，予以常规制片，制备为4 μm厚切片。

3)免疫组化染色。胸水经沉渣包埋切片后，以EnVision法进行免疫组化染色，选择福州迈新生物技术有限公司生产的CK7、CEA、Napsin-A、Villin、TTF-1、CK20、CR、MC、P120、PR、ER、Cal125等抗体及相关试剂。切片进行常规脱蜡、水化后，抗原修复，滴加一抗后，于室温下孵育60 min，并予以冲洗，再滴加二抗，孵育15 min后，再次冲洗，苏木素复染，盐酸乙醇分化，切片脱水、封片。

1.3 统计学方法

使用SPSS20.0统计软件进行统计学分析，计数资料以百分率表示，比较采用卡方检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

沉渣包埋切片联合免疫组化检测结果显示，41例胸水检出38例癌细胞阳性，3例可疑阳性，阳性率为92.68%；液基细胞学检测结果显示，41例胸水检出31例癌细胞阳性，10例可疑阳性，阳性率为75.61%。二种检查方法癌细胞阳性率比较差异有统计学意义(χ2=4.479，P<0.05)。

沉渣包埋切片联合免疫组化检出的38例癌细胞标本中，病理诊断肺腺癌27例、胸膜恶性间皮瘤3例、胃肠道腺癌6例、卵巢浆液性乳头状癌1例、乳腺癌1例，见表1。

表1 胸水沉渣包埋切片免疫组化染色与病理诊断结果比较

3 讨论

恶性胸水具有较高发生率，较多恶性肿瘤均伴有胸水症状，目前临床用于胸水诊断的主要手段为脱落细胞学检查，包括沉渣包埋切片、液基细胞学检测及直接离心涂片等。直接离心涂片存在结构不清、细胞重叠等问题，对诊断结果有较大影响；液基细胞学虽然细胞分布均匀、核染色质较为清晰，但诊断准确性仍难以达到要求。有研究[2]指出，胸水沉渣包埋石蜡切片技术对胸水检测的阳性率高，且标本易保存，能进行连续切片，利于免疫组化染色，在肿瘤细胞类型判断中具有重要作用。另有报道[3]表明，胸水沉渣包埋切片细胞形态与组织学形态相似，能最大程度保持肿瘤组织学排列结构，可提高鉴别诊断准确性。本研究中，41例胸水标本经沉渣包埋切片及免疫组化检测，结果显示38例为恶性肿瘤细胞，阳性率达到92.68%，与液基细胞学检测结果比较，检出率显著较高(P<0.05)，提示胸水沉渣包埋切片联合免疫组化检测能有效提高细胞学诊断准确率，具有较高临床价值。

有学者[4-5]认为，胸水沉渣包埋石蜡切片与免疫组化染色结合，并通过细胞形态特征及影像学资料，能对肿瘤细胞组织学类型以及组织来源予以明确，为疾病临床诊治提供重要参考。本研究38例癌细胞阳性胸水标本中，有27例为肺来源腺癌，构成比为71.05%，可见胸水沉渣包埋切片同CK20、CK7、CEA、Napsin-A、Villin、TTF-1等免疫组化标记联合检测，在肺腺癌诊断鉴别中具有确切价值。有研究[6]指出，Napsin-A、TTF-1在原发性肺腺癌中的表达，特异度及敏感度较高；Villin作为一种在肠上皮分布的绒毛蛋白，在肠腺癌诊断鉴别中有重要作用；CEA在腺癌，特别是肺腺癌、消化道腺癌中表达较高。CK20(+)、CK7(-)、CEA(+)、Villin(+)、TTF-1(-)提示胃肠道腺癌，本研究中，胸水中胃肠道腺癌共6例，构成比为15.79%，仅低于肺腺癌。有研究[7-8]指出，肺腺癌同胸膜间皮瘤具有相似细胞学形态，在胸水细胞学诊断中，两者鉴别具有较大难度，而通过沉渣包埋切片联合标记TTF-1、CEA、CR、MC等可予以明确诊断。TTF-1(-)、CEA(-)、CR(+)、MC(+)可提示间皮来源，本研究通过沉渣包埋切片与免疫组化检测发现有3例患者为恶性间皮瘤，且标记CK20(-)、CK7(+)、Cal125(+)、CEA(-)、TTF-1(-)发现1例卵巢癌来源，通过标记P120(+)、PR(+)、ER(+)、CK7(+)、TTF-1(-)、CEA(-)发现1例乳腺癌来源，提示多种抗体联合应用性免疫组化标记，可对部分抗体表达意义不明确造成的误差予以克服。

综上所述，胸水沉渣包埋切片联合免疫组化检测，可有效提高胸水细胞学诊断准确度，同时可对肿瘤细胞组织来源进行判断，具有较高临床应用价值。