蔡志杰　许奎

摘要：通过对目标猪场实施猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗的全面免疫，配合定期的血清学检测，对3个养猪场进行了猪伪狂犬病净化研究。在净化过程中，对3个猪场的生产公母猪群、后备猪群进行血检，对阳性猪、可疑猪实施淘汰，后备猪必须是阴性才留作种用，并辅以良好的饲养管理，最终使整个种猪群伪狂犬病的阳性数为零，表明利用伪狂犬基因缺失的弱毒疫苗对生产的公母群、后备猪群进行全面免疫接种并配合血检淘汰阳性种猪的方法来净化猪场是可行的。

关键词：猪伪狂犬病；免疫；检测；净化

中图分类号：S858.28 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2018）05-0012-02

伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起家畜和多种野生动物感染的一种急性传染病，仔猪感染PRV后表现有高热、食欲废绝、呼吸困难、流涎、呕吐、腹泻、神经症状，2周龄内仔猪死亡率高达100%；怀孕母猪流产，产死胎和木乃伊胎；母猪返情、屡配不孕，公猪睾丸炎[1]。猪感染该病毒后可终身带毒，并向外排毒，呈现免疫抑制，导致猪体免疫耐受，因此在种猪阶段就应净化根除。

伪狂犬病的控制与净化工作在很多发达国家早已开展，许多国家实施的强制性伪狂犬病净化项目已取得成功，我国也有集约化猪场成功净化PR的案例[2]。近年来，由于疫苗使用缺乏科学性等原因，导致甘肃省武威市凉州区PRV野毒感染率较高，为降低猪群感染率，提高养殖效益，并参照国外应用基因缺失苗净化猪伪狂犬病的成功经验[3，4]，采取改变免疫程序，使用高效力基因缺失弱毒疫苗免疫、定期检测、淘汰阳性种猪等综合性净化措施，在我区三个规模较大的养猪场实施了PRV净化工作，取得了良好的净化效果。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物的选择 选择3个规模化、标准化程度较高的养猪场，分别称作A猪场、B猪场、C猪场，养殖情况如下：A猪场存栏生产母猪270头，B猪场存栏生产母猪220头，C猪场存栏生产母猪190头。在实施猪伪狂犬病净化前，这3个养猪场按常规方法进行免疫。

1.1.2 试剂与仪器 伪狂犬病gE基因缺失弱毒苗购自美国一家疫苗生产公司；猪伪狂犬gE-ELISA抗体鉴别试剂盒购自美国IDEXX公司。美灵SJ-8酶标检测仪，Finnpieptte Freshman移液器，高速离心机，一次性兽用采血器。

1.2 方法

1.2.1 猪血清的采集 按要求定期采集各场猪血清，离心后编号保存。

1.2.2 检测方法 按照ELISA试剂盒的操作说明，进行猪伪狂犬病感染抗体的鉴别诊断。

1.3 免疫程序

各类猪群的免疫均按照疫苗的标准剂量进行免疫。对于经产母猪和公猪，从未做过猪伪狂犬病基因缺失弱毒苗的，在试验开始时做第一次免疫，4周后做第2次免疫，以后每隔4个月免疫1次。后备公、母猪，第10周龄第1次免疫，第14周第2次免疫，第20～26周龄第3次免疫，以后每4个月免疫1次。引进后备公、母猪：引进的第2天免疫1次，4周后作第2次免疫，以后每4个月免疫1次。

1.4 管理

对于后备公、母猪执行3周龄早期断奶。改善饲养管理，提供优质、科学和充足的营养饲料，满足机体营养需求；做好清洁、消毒工作，及时清理粪便，定期用高效消毒药进行消毒；采用全进全出及同日龄阶段饲养，并设置专门的病猪隔离圈舍。猪场严格禁止饲养犬、猫及家禽，杜绝犬、猫、鸡及鸟类进入猪场，定期进行场内灭鼠、灭蝇工作。

1.5 净化方案

（1）A猪场、B猪场、C猪场从2015年1月份开始使用猪伪狂犬基因缺失弱毒苗（gE缺失），进行常规免疫，从同年5月份开始对3个猪场种公猪、生产母猪分批采血检测，逐步开始分群，将野毒感染血清学阳性猪与健康阴性猪分开饲养。

（2）逐步淘汰野毒感染血清阳性生产母猪，阳性率大于15%的分批淘汰，小于15%的一次性淘汰。

（3）对于更新后备猪群，在选留前进行血检，检测阴性猪留用。种猪群净化后连续2次抽样血检，在经过全面血检全部淘汰野毒感染血清阳性及可疑者后，生产猪群以随机抽样的方式连续2次抽样血检。

2 结果与分析

2.1 生产种猪群伪狂犬病野毒感染血清学检测结果

从A、B、C 3个猪场共检测生产母猪680头，检出阳性猪52头、可疑猪68头，阳性率为7.64%；阴性猪560头，阴性率为82.35%；检测种公猪50头，检出阳性猪5头，可疑5头，阳性率为10%， 阴性猪40头，阴性率为80%。

2.2 后备母猪伪狂犬病野毒感染血清学检测结果

检测后备母猪1 025头，检出阳性猪15头，可疑猪15头，阳性率1.46%，阴性猪1 738头，阴性率97%。

2.3 猪群净化后伪狂犬病野毒感染血清学检测结果

通过对猪场2年的净化工作，对检出的野毒感染血清学阳性猪逐步分批次或1次性淘汰，3个猪场严格的按照制定的免疫程序，使用猪伪狂犬病基因缺失疫苗进行免疫接种。随着对猪场猪伪狂犬病净化的不断深入，至2016年12月底，通过连续2次抽查检测，3个猪场的检测结果均为野毒感染血清学检测阴性，达到了预期制定的净化目标。净化后A、B、C 3个养猪场第1次检测种公母猪360头、第2次检测360头，检测后备种猪270头，检测结果均为阴性。

3 小结

通过高质量猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗的全面应用和定期的实验室检测，首先将生产公猪群净化，然后将各场生产母猪群中阳性者逐步淘汰，严格执行全进全出的管理方法，全群严格按时免疫，对更新的后备猪群严格血检，阴性猪留作种用。通过循环更新淘汰，最终使生产种公母猪全部净化为阴性猪群。在接下来的2次连续抽检结果全部为阴性，可以看出，3个猪场净化伪狂犬病是成功的。

本试验证明猪群伪狂犬病病毒及野毒在我区猪场中广泛存在，证实了利用ELISA检测方法在净化猪群伪狂犬病过程中的准确性，为今后猪伪狂犬病的防控提供了真实可靠的试验数据和研究方法[5]。依据此研究方法进行猪群抗体检测、野毒鉴定、淘汰带毒种猪、培育健康种猪群，结合高质量的基因缺失弱毒疫苗全面免疫接种、定期消毒、分区隔离管理、全进全出等综合防制技术来净化猪场，是控制并逐渐消灭猪伪狂犬病的有效途径[6]。根据检测结果，待猪群阳性率下降至10%～15%以下时，进行全面淘汰阳性种猪；更新留用后备母猪为阴性方可留为种用；猪群应在检测结果全部为阴性后，隔2～3个月作复检2次，結果全部为阴性后，方可认为猪伪狂犬病在该猪群得到净化[7]。

规模养殖场猪伪狂犬病的彻底净化和根除，是一项长期的系统工程，检测技术和防控净化技术还需要不断的改进和完善。我区作为全国的生猪养殖大区，猪场猪群中的感染率较高，必须采取科学有效的措施加以防制，减少给养猪业造成的经济损失[8]。目前正逐步将此方法向全区规模化猪场进行技术推广，不断的提升猪群的健康水平，促进我区养猪业的健康和谐发展。

参考文献：

[1] 殷 震，刘景华.动物病毒学[M].第二版.北京：科学出版社，1997.

[2] 童光志，陈焕春.伪狂犬病流行现状及我国应采取的防制措施[J].中国兽医学报，1999（1）：1-2.

[3] 陈 忠，谭 海，杨傲冰.规模化猪场猪伪狂犬病净化技术的探讨[J].广东畜牧兽医科技，2003（3）：45-46.

[4] 杨丽梅，林绍荣.种猪场伪狂犬病净化的探讨[J].广东养猪业， 2001（4）：32-34.

[5] 刘忠琛，王欣志.规模猪场伪狂犬病的免疫与控制[J].动物保健，2006（4）：10-11.

[6] 温情萍.猪伪狂犬病gE抗体ELISA检测在净化中的应用[J].畜牧兽医科技信息，2005（6）：64-65.

[7] 牛建强，蓝 天，等.伪狂犬病免疫净化方案的评价[J].养猪，2007（5）：55-56.

[8] 郭全海，赵香菊.猪伪狂犬病的诊断与防制[J].中兽医学杂志，2014（2）：18-20.