张海峰，张彬，周国雄，陈卫昌

（1.南通大学附属医院，江苏 南通 226001；2.苏州大学附属第一医院，江苏 苏州 215006）

肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）是溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）主要促炎因子。研究表明，TNF-α在UC血清、局部组织中的表达明显升高[1-7]。雷公藤内酯醇（Triptolide，TL）是从中药雷公藤中分离的二萜内酯化合物，具有抗炎、免疫调节作用[8-17]。本实验应用TL治疗UC小鼠，观察治疗前后小鼠的病情变化，以及TL与疾病的相关性，进一步明确TL是否对UC有疗效，以及是否与抑制TNF-α的表达有关。

1　材料与方法

1.1　材料

选择4～6周龄SPF级雌性BALB/c小鼠80只，由南通大学动物实验中心提供，在南通大学动物实验中心动物房按常规方式喂养。葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium salt,DSS）（美国 MP Biomedicals公司），TL（中国南京泽郎医药科技有限公司），Trizol抽提RNA试剂（美国Invitriogen公司），PCR试剂盒（日本TaKaRa公司），TNF-α多克隆抗体（兔抗小鼠，美国Abcam公司），二抗（北京中杉金桥生物技术有限公司）。本实验已通过南通大学附属医院医学伦理委员会审批。

1.2　方法

1.2.1动物模型的复制按STEVCEVA[18]和张艳丽等[19]的方法复制DSS实验动物模型，除空白对照组外，其他组小鼠饮用5% DSS溶液（5g DSS溶于100 ml蒸馏水）7 d。

1.2.2实验分组将80只雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、生理盐水组、丙二醇组、地塞米松组、美莎拉嗪组，以及TL 1、2、3组8组，分笼饲养，每笼10只。空白对照组：不予任何处理；生理盐水组：DSS模型复制成功后腹腔注射生理盐水0.2 ml/次，1次/d；丙二醇组：腹腔注射20%丙二醇0.2 ml/次，1次/d；地塞米松组：地塞米松0.1 mg/（kg·d）溶于生理盐水中腹腔注射；美沙拉嗪组：美沙拉嗪20～30 mg/kg溶于水中经胃管注入，3次/d；TL 1组：TL溶于20%丙二醇，腹腔注射药量为0.20 mg/（kg·d）；TL 2组：TL溶于20%丙二醇，腹腔注射药量为0.40 mg/（kg·d）；……