余佳佳， 刘婧娴， 李媛睿， 俞 静， 刘 瑛

（上海交通大学医学院附属新华医院检验科，上海 200092）

肺炎克雷伯菌是肠杆菌科细菌中常见的病原菌之一，临床分离率高达14%[1]。目前肺炎克雷伯菌的耐药形势越来越严峻，对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率在10%以上[1-2]。对于此类耐药菌，经验性单一抗菌药物的使用可能会导致抗感染治疗失败[3]。耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistantKlebsiella pneumoniae，CRKP）的主要耐药机制是产碳青霉烯酶。我国流行的CRKP 70%以上为ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌[4-5]。因此，及时、快速地检测该型别肺炎克雷伯菌对指导临床抗菌药物的使用和控制院内耐药性的传播有重要意义。

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption ionization timeof-flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS）是近几年来用于微生物鉴定的有效工具，因具有快速、简便等优点使其在临床微生物实验室得到广泛应用。根据国外文献报道，MALDITOF MS除了可以用于细菌种属鉴定外，还具有鉴别亚型的潜力[5-9]。本研究旨在利用MALDITOF MS筛选出ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌的特异峰，从而在微生物实验室临床常规鉴定工作中可快速检测该型别肺炎克雷伯菌。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 选取2009—2016年上海交通大学医学院附属新华医院微生物实验室前期收集并已进行碳青霉烯酶基因检测以及多位点序列分型（multilocus sequence typing，MLST）的肺炎克雷伯菌207株，其中118株（ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌67株，非该型别的肺炎克雷伯菌51株）作为特异峰筛选组；89株（ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌37株，非该型别的肺炎克雷伯菌52株）作为特异峰验证组，其中9株产KPC-2肺炎克雷伯菌由复旦大学附属华山医院（5株ST423型，2株ST65型，1株ST11型）和上海交通大学附属儿童医院（1株ST11型）提供。……