以液相色谱-质谱/质谱法测定蜂蜜中5种吡咯里西啶类物质的回收率

2018-06-20于海丰王海澍鞍山市食品药品检验所

食品安全导刊 2018年15期

关键词：千里光吡咯生物碱

□ 于海丰张兰申利王海澍鞍山市食品药品检验所

吡咯里西啶类生物碱存在于自然界有花植物中，这类物质很容易在蜂蜜中残留。人类长期食用这种生物碱会导致肝损伤，甚至癌变。目前，大多数研究都针对其医学毒性展开，而对这类物质的检测及食品中残留限制的研判并不多。

1 实验测试

1.1 仪器

液相色谱-质谱/质谱仪（Agilent 1260-6460），超声波清洗器（舒美KQ-100DB），电子天平（梅特勒ME204E），旋涡混合器，离心机（美国贝克曼Allera64R），氮吹仪（上海屹尧MS-10），固相萃取装置。

1.2 试剂

倒千里光碱（Retrorsine）、克氏千里光碱（Senkirkine）、千里光菲林（Seneciphylline）、千里光宁（Senecionine）、野百合碱（Crotaline），纯度均为99%，德国Dr.Ehrenstorfer生产；色谱级乙腈、甲醇、甲酸88%、乙酸铵，美国Fisher生产；试验用水为屈臣氏蒸馏水；强阳离子固相萃取柱（SCX 3mL/60mg），美国Waters生产。

1.3 标准溶液配制

精密称取各标准品20 mg（精确至0.1 mg），用甲醇溶解，并转移至20 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，制成浓度为1 mg/mL的标准储备液，于-18℃条件下保存，有效期3个月。用0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液混合溶液（9+1）稀释，摇匀，作为系列标准工作溶液，浓度为1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、50.0 ng/mL、100.0 ng/mL、200.0 ng/mL，现用现配。

1.4 样品前处理

称取1.0 g蜂蜜样品（精确至0.01 g）于50 mL离心管中，加入10 mL0.1%甲酸水溶液，于涡旋混合器上混合提取5 min，再超声5 min后，于8 000 r/min离心5 min，取上清液，作待净化液。SCX固相萃取柱依次用甲醇4 mL、水3 mL活化，保持柱体湿润。取待净化液1 mL过柱，依次用水3 mL、甲醇3 mL淋洗，抽干，用6 mL5%氨化甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，将洗脱液在氮气流下吹干，用1 mL0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液混合溶液（9+1）溶解残渣，经0.22 μm有机相滤膜过滤后供液相色谱-质谱/质谱联用仪分析测定。

1.5 测试条件

色谱柱：RRHD Eclipse PLUS C18，2.1 mm×100 mm，1.8 μm；流速：0.25 mL/min；柱温：30℃；进样量：5 μL；驻留时间：2 min；离子源：电喷雾正离子源（ESI+）；检测方式：多反应监测MRM；毛细管电压：4 000V；源温度：300℃；碰撞气：氮气0.4 mL/min；锥孔气：17 L/h。