刘文 邓美霞 张晓红 赵铁 罗茜 赵飞骏 尹卫国

421001湖南衡阳，南华大学病原生物研究所 特殊病原体防控湖南省重点实验室（刘文、邓美霞、张晓红、赵铁、罗茜、赵飞骏）；汕头大学医学院附属粤北人民医院检验科（尹卫国）

梅毒的诊断目前主要依靠血清学诊断［1］。以梅毒螺旋体（Treponema pallidum，Tp）外膜蛋白和鞭毛蛋白为基础的酶联免疫法和化学发光法因其客观、准确、耗时短，易于自动化和数字化等优势［2］，在梅毒血清学诊断中得到了一定的应用。代表性的诊断抗原包括 TPN15（Tp1071）、TPN17（Tp0435）、TPN47（Tp0574）、TPN44.5（TmpA，Tp0768）和Tp0663等膜脂蛋白［3-4］，以及鞭毛蛋白 FlaB1、FlaB2 和FlaB3［5］。目前特异性血清学方法尚不能用于评价梅毒的疗效［1］。临床以非Tp为基础的血清学试验，如快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）和甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等，主要用于梅毒的判愈实验，但假阳性率较高。本课题组在前期动物实验筛选Tp体内诱生抗原过程中，发现Tp0462可能具有体内诱生抗原的特点，并与Tp感染新西兰兔血清和临床梅毒患者血清标本有较好的反应性。因此，在本研究中，我们构建重组蛋白Tp0462，鉴定其是否为体内诱生抗原，同时建立间接ELISA法，以临床患者血清标本进行Tp0462血清学诊断的评价，为寻求新的梅毒血清学诊断方法奠定基础。

材料和方法

一、材料

1.实验动物：新西兰兔（SYXK湘2010-0006）由南华大学医学科学研究中心实验动物部提供并饲养，饲养室温18～20℃，饲料和饮用水无抗生素。

2.菌株和质粒：Tp Nichols标准株由上海市皮肤病性病医院检验科顾伟鸣主任和厦门大学中山医院检验科杨天赐主任惠赠，并由南华大学医学院病原生物研究所成功传代保存。……