杨赛琳 许文 林福全 周妙妮 许爱娥

310009杭州，浙江中医药大学附属杭州第三医院皮肤科

白癜风是以Th1型细胞为主介导的疾病，γ干扰素（IFN-γ）是Th1淋巴细胞分泌的重要细胞因子之一，IFN-γ与受体结合后，促发Janus激酶信号转导和转录激活物（JAK-STAT）级联反应，促动JAKS和STAT磷酸化，诱导趋化因子表达［1］。趋化因子受体3及其配体CXCL9和CXCL10被认为是在白癜风等自身免疫和炎症过程中促进T细胞迁移最相关的趋化因子轴之一［2］。CXCL9、CXCL10等在白癜风发生发展中起关键作用［3-5］。在白癜风患者血清中CXCL9和CXCL10比健康人高，血清CXCL10可能是监测疾病活动和指导进展期白癜风治疗的新型生物标志物［6］。与健康人相比，在白癜风患者病灶周围皮肤中CXCL10和IFN-γ表达增加［2］。他克莫司（tacrolimus）是一种免疫调节剂，临床上已证明其治疗白癜风有效［7］。Tu等［1］研究表明，他克莫司对HaCaT细胞IFN-γ相关细胞因子产生影响。他克莫司下调IFN-γ诱导的IFN-γ受体α、磷酸化Janus激酶2（pJAK2）、磷酸化信号转导和转录激活因子1（pSTAT-1）和CXCL8表达。尚未见他克莫司对HaCaT细胞中IFN-γ诱导的趋化因子CXCL9、CXCL10及Janus激酶1信号途径的影响。本研究采用实时荧光定量PCR及Western印迹法检测他克莫司对IFN-γ刺激HaCaT细胞分泌CXCL9、CXCL10及相关信号途径关键蛋白的影响，为他克莫司治疗白癜风作用机制的研究提供依据。

一、材料

他克莫司由海正药业杭州有限公司生产（批号TAB0160901，纯度99.1%），rhIFN-γ为美国Perpotech公司产品，人角质形成细胞株HaCaT购于上海博谷生物科技有限公司，MTT、胎牛血清为美国Gbico公司产品，反转录PCR试剂盒为美国罗氏公司产品，CXCL9、CXCL10引物由广州复能公司设计合成。……