陈功 陈祥 朱丹丹 王自谱 张小洁 信照亮

迟发性脑缺血（DCI）是蛛网膜下腔出血（SAH）最重要的并发症，与蛛网膜下腔内发生的非特异性炎症密切相关。研究发现，蛛网膜细胞作为蛛网膜下腔中固有的巨噬细胞，具有抗原提呈能力，能够参与启动SAH后的炎症反应[1-2]。Kai等[3]报道，SAH 时脑脊液（CSF）中凝血酶的水平与出血严重程度、SAH病情的发展和脑血管痉挛密切相关。凝血酶已成为实验性SAH的常用诱导剂。近年来人们逐渐认识到，在不同环境中的巨噬细胞可以发生不同性质的活化，成为具有不同活化表型和功能特征的亚群。蛛网膜细胞具有单核巨噬细胞的类似功能，被认为是蛛网膜下腔中的固有巨噬细胞，能够参与SAH后蛛网膜下腔中的炎症反应。因此，研究蛛网膜细胞的极化能力有助于阐明蛛网膜下腔细胞免疫功能低下和SAH后炎症的发生机制。有研究报道认为，IL-6是SAH后CSF中主要的促炎因子[4]，但IL-6是否可以影响蛛网膜细胞的M1/M2状态，未见报道。本实验采用体外培养的大鼠蛛网膜细胞，经外周巨噬细胞极化诱导因子GM-CSF或M-CSF分别刺激后，采用ELISA法检测极化相关因子IL-6、IL-12p40（M1极化标志性因子）、IL-10（M2极化标志性因子）的变化，观察是否可以诱导蛛网膜细胞发生极化；然后用凝血酶作为激活剂活化蛛网膜细胞在体外模拟SAH状况，再采用不同剂量IL-6刺激活化的蛛网膜细胞和正常（非活化）蛛网膜细胞，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法观察CD68（单核-巨噬细胞标志物）、CK8+18（蛛网膜细胞标志物）、IL-12p40、IL-23（M1 极化标志性因子）、精氨酸酶-1（Arg-I）（M2极化标志性因子）的RNA（相对）表达水平，以研究IL-6对大鼠蛛网膜细胞极化状态的影响和量效关系。……