王军锋，李思佳，王晓兰

(陕西学前师范学院 化学与化工系，陕西 西安 710100)

石榴，营养丰富，其籽粒味道甘美，且石榴含有丰富的维生素C。维生素C，又称L-抗坏血酸，是人体必需营养素之一，缺乏维生素C会致使坏血病，因此，必须从食物中获取。目前测量维生素C的方法主要有高效液相色谱法[1]；紫外分光光度法；碘量法；荧光法[2]；电化学法[3]，滴定法、酶法；以及2、4-二硝基苯肼法等，除此之外Deutsch和Weeks曾经报道过一种检测维生素C的荧光分析法(OPDA)，并被指定为维生素C的经典荧光分析法[4]。在该方法中，维生素C先被活性炭(Norit)氧化为脱氢抗坏血酸(DHAA)，DHAA再与荧光底物邻苯二胺(OPDA)结合生成荧光产物，通过对该荧光产物的检测实现对维生素C的定量分析[5]。本文基于维生素C在草酸作溶剂不外加增敏剂的条件下经Cu2+氧化后与邻苯二胺反应生成一种较强的荧光物质，通过对体系荧光强度的测定进行维生素C的定量分析，其荧光强度与维生素C的浓度成正比，该方法所涉及的体系稳定性好，据此优化了荧光测定维生素C的方法。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器

日立F-7000荧光分光光度计；上海F-960荧光分光光度计；PHS -3C精密pH计，上海雷磁仪器厂； 水浴锅。

1.1.2 试剂

抗坏血酸(分析纯)；1%草酸溶液；CuSO4溶液：0.04mg/mL；维生素C标准储备液：1mg/mL，2～8℃避光保存；NaOH-邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液；HAc-NaAc缓冲溶液；NaOH-KHPO4缓冲溶液；KH2PO4- Na2HPO4缓冲溶液；500g/L乙酸钠溶液；0.2g/L邻苯二胺溶液(临用前配制)；30g/L硼酸-500g/L乙酸钠溶液(临用前配制)；偏磷酸-乙酸溶液；试验用水为蒸馏水。

1.2 原理

维生素C自身没有荧光，样品中还原性抗坏血酸(维生素C)在草酸溶液后溶解后经氧化剂(Cu2+)氧化为脱氢抗坏血酸(DHAA)，再与邻苯二胺(OPDA)反应产生具有荧光的喹喔啉，其荧光强度与维生素C的浓度在一定范围内呈线性关系。……