陈素琴，袁海洪，冯立新

(天津市武清区人民医院病理科，天津 301700)

甲状腺肿瘤占所有肿瘤的1%，其中大部分为内分泌恶性肿瘤[1]，并且其发生率在近几年快速增加[2]，尤其是甲状腺乳头状癌(PTC)[1]。PTC的男女发病率之比为1∶4，提示雌激素在PTC的发生发展中可能具有重要作用，雌激素经典的信号通路是由两个细胞内受体介导的，即雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)。而基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达异常与人类恶性肿瘤的浸润与转移密切相关[3]。为了研究ERα、ERβ对人类PTC中癌细胞的迁移和侵袭的影响，我们采用免疫组织化学(免疫组化)法检测ERα、ERβ和MMP-9在200例PTC组织和100例结节性甲状腺肿(NTG)中的表达，探讨三者与PTC临床病理特征之间的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料收集2003年6月至2016年7月间天津市武清区人民医院病理科常规外检的200例PTC和100例NTG患者切除的组织包埋块。其中PTC患者中男性47例，女性153例；年龄范围25～60岁，中位年龄45岁；肿瘤≥2 cm者86例，<2 cm者114例；有包膜侵犯者107例，无包膜侵犯者93例；有淋巴结转移者79例，无淋巴结转移者121例；根据TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期134例，Ⅲ～Ⅳ期66例。所有病例在肿瘤切除前均未进行放疗和化疗。所有病例均经两位副主任医师以上病理医师阅片明确诊断为PTC和NTG。

本研究经天津市武清区人民医院医学伦理委员会批准，患者及其近亲属知情同意。

1.2研究方法免疫组化Elivision两步法 将准备好的石蜡组织块，切成石蜡切片，置于67 ℃烘箱中，烘片2 h，脱蜡至水，用pH 7.4的PBS冲洗3次，每次3 min。取一定量pH 6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理10 min，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲液中取出玻片，先用蒸馏水冲洗两次，之后用PBS冲洗2次，每次3 min。每张切片加1滴3%双氧水，室温下孵育10 min，以阻断内源性过氧化物酶的活性。……