张玉萍，姚茹冰，赵智明，蔡辉

(南京军区南京总医院中西医结合科，江苏 南京 210002 )

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是以关节滑膜炎症为基本病理表现的自身免疫性疾病，可引起受累关节的肿胀疼痛、活动受限，炎症持续进展可造成对软骨及骨的破坏，造成关节畸形和功能丧失，具有高度的致残性。青藤碱(sinomenine,SIN)是从中药青风藤中提取的生物碱单体，药理研究发现其具有抗炎、免疫抑制等作用，对RA有较好的疗效[1]。胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型是目前公认的RA动物模型之一，本研究建立CIA小鼠模型，通过观察小鼠关节炎指数(arthritis index,AI)评分、血清炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)、滑膜核因子-κB (nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白的变化及SIN的干预作用，以探索SIN治疗RA的可能作用机制。

1 材料与方法

1.1材料DBA/1小鼠30只，6周龄，雄性，购于常州卡文斯实验动物有限公司，使用许可证：SCXK(苏)2011-0003。青藤碱(正清风痛宁片)，湖南正清制药股份有限公司产品；牛Ⅱ 型胶原、完全弗氏佐剂(CFA)、不完全弗氏佐剂(IFA)，美国Chondrex公司产品；小鼠TNF-α ELISA试剂盒，小鼠IL-17 ELISA试剂盒，深圳欣博盛生物科技有限公司产品；NF-κB p65抗体，英国Abcam公司产品。

1.2方法

1.2.1动物分组 30只DBA/1小鼠用随机数字表法分成3组：即正常组、CIA组、SIN组，每组各10只，其中CIA组和SIN组的20只小鼠均先诱导建立CIA模型(正常组除外)，在造模及给药过程中每组小鼠均有意外死亡，至最后实验数据统计，正常组剩余小鼠9只，CIA组9只，SIN组8只。

1.2.2造模 参照文献[2]方法诱导建立CIA小鼠模型。将牛Ⅱ 型胶原与完全弗氏佐剂等体积研磨配置牛Ⅱ 型胶原乳剂，待乳剂乳化完全，于小鼠尾根部皮内免疫注射，分2次注射，每次各100 μL，初次免疫当天记为d 1，d21给予加强免疫注射。……