郑亚国，林松，张航，谢渡江，周陵，陈绍良

肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension，PAH）是一种以肺动脉内膜增生、中膜肥厚及丛样病变为特征的一种疾病[1]。PAH的发病机制与遗传因素密切相关，目前指南把可遗传性PAH单独列为PAH的1个亚型。已知骨形成蛋白受体2（bone morphogenetic protein receptor 2, BMPR2)、活化素受体 类 激 酶 1（activin receptor-like kinase 1, ALK1）、Smad蛋 白 9（SMAD9）、 小 窝 蛋 白 l（caveolin-1,CAV-l)和钾离子通道蛋白3（KCNK3）等多种基因突变和PAH发病有关[2]。目前研究发现，BMPR2是目前已知的最主要的PAH致病基因，约70%的可遗传性PAH及26%的特发性PAH患者存在BMPR2基因突变，公共数据库ClinVar（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/clinvar）共计报道了超过500个BMPR2的不同突变位点[3-5]。本研究中，我们利用全外显子组测序方法对一个PAH家系进行研究，以发现BMPR2基因的突变位点。

1 资料与方法

研究对象：收集2016-11来本院就诊的一个中国汉族PAH家系的资料， 3代共8人，所有成员均为江苏籍汉族人，有2位已确诊为PAH，其中男性1例（先证者），女性1例，为母子关系（图1）。另选择100名健康志愿者作为正常对照。PAH的诊断标准依据2015年欧洲心脏病学会PAH诊治指南[1]。对所有家系成员进行病史采集、体格检查、心电图及超声心动图检查，同时对先证者及超声心动图怀疑PAH的家系成员进行生化、免疫学检查、六分钟步行距离及右心导管检查等更为详尽的临床评估。所有入选家系成员和健康志愿者均签署知情同意书。

图1 该肺动脉高压家系图

标本采集及DNA提取：选用乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝管分别收集本研究家系8名成员的外周静脉血5 ml。按照DNA提取试剂盒（Qiagen, 德国）说明书提取基因组DNA。采用紫外分光光度法测定提取DNA的浓度与纯度，-20℃分装保存。……