金毅然 马斌武 孙文青 韩怀钦 何仲义 牛建国

目前脑缺血已成为临床常见多基因疾病，其发病率、致残率、病死率逐年提高。基因的单核苷酸多态性(SNPs)是形成个体间差异的重要遗传学基础。怎样从数百万SNP中找到确有临床意义的功能性SNP，是个体化医学所面临的重大挑战[1]。

功能性的SNP可能影响基因的表达水平及蛋白的活性，进而影响其在机体细胞内的功能[2]。解偶联蛋白2(uncouple protein 2，UCP2)参与调控细胞内过氧化物质(ROS)的生成，其基因多态性(图1)已经被众多研究者在不同人群中证实[3]。宁夏地区的回族人群中，脑缺血发病率在逐年升高。目前尚无UCP2基因多态性在回族人群中的分布资料。本研究以宁夏地区回族人群为研究对象，分析UCP2基因多态性在回族人群的分布特点及UCP2SNP与脑缺血发病风险的相关性。

图1 UCP2基因多态性分布位点示意图

1 对象与方法

1.1 研究对象

回族脑缺血患者诊断及正常对照组：脑缺血组71例，来自2014年1月-2015年10月在宁夏医科大学总医院就诊的宁夏地区回族住院患者，年龄50～65岁，均行颅脑CT和/或MRI检查证实脑缺血，诊断依据中华医学会神经病学分会脑血管病学组急性缺血性脑卒中诊治指南；对照组97例，为同期门诊查体宁夏回族健康者，年龄50～65岁。所有研究对象均行生化项目检查并签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 样本基因组DNA提取 采集外周血，经抗凝后采用QIANGEN minikit按试剂盒说明书进行基因组DNA提取，利用Nanodrop ND1000测定DNA浓度，用琼脂糖凝胶电泳判断DNA质量，筛选优质DNA做后续实验。

1.2.2 聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术 采用Oligo7.0软件设计引物。……