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实时荧光定量PCR检测马尔尼菲篮状菌病组织样本中菌载量的研究

2018-05-17郑艳青史娜娜曹存巍

中国真菌学杂志 2018年2期
关键词:检测

郑艳青 史娜娜 曹存巍

(1.广西医科大学第一附属医院皮肤性病科,南宁 530021;2.南宁市第四人民医院,南宁 530023;3.广西艾滋病防治研究重点实验室,南宁 530021)

马尔尼菲篮状菌病 (talaromycosis marneffei,TSM)在东南亚、我国南方,尤其是广西、广东具有区域性流行[1],TSM好发于免疫受损患者[2],尤其是AIDS患者,据统计广西19%的AIDS患者合并T.marneffei感染,是仅次于结核的第二大机会性感染[3]。值得注意的是,近年来TSM在未合并基础疾病,细胞免疫功能未见异常的人群中发病数逐渐增多[4]。TSM病情隐匿,临床表现错综复杂,缺乏特征性,容易误诊和漏诊,若不早期诊断和及时治疗死亡率高 (超过80%)[5]。本研究组前期应用实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qPCR)技术,设计出具有高度特异性的T.marneffei引物和Taqman探针,建立了稳定、高度特异、敏感、快速的检测体系。在初步临床检测中,55例首次采集的血清样本首次qPCR检测呈阳性,与真菌培养结果一致性高达100%,耗时比真菌培养确诊提前5~14 d,此方法有助于快速、特异性诊断TSM[6]。本研究基于前期研究结果,将临床样本扩展到病理切片、活检组织,期望从不同的临床样本中收集T.marneffei感染证据,为TSM的快速确诊提供坚实、可靠的证据。

1 材料与方法

1.1 研究对象

2017年1~6月期间,收集首次就诊于广西医科大学第一附属医院的5名HIV阴性TSM患者样本,包括肩部、臀部、前额、手背病理切片样本共5例,淋巴结活检组织样本1例。患者基本情况见表1。

1.2 方法

表1 TSM患者基本信息和临床表现

注:/.无合并症

1.2 方法

病理组织切片总DNA提取 将石蜡包埋的病理组织,切3~5薄片放入2 mL离心管中。……

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