王晶晶

本文主要介绍了禽流感病毒的基本特性、流行病学特征和诊断方法。

中图分类号：S855 文獻标志码：C 文章编号：1001-0769（2018）11-0001-05

1  总体介绍

甲型流感病毒不仅感染禽类，还是全球重要的人兽病原体。这些病毒具有复杂的生态学和流行病学，涉及各种野生、圈养和驯养的禽类宿主以及各种野生和驯养的哺乳动物宿主，包括人、猪、马和狗等。

甲型流感病毒会引起一系列临床疾病症状。这些症状与病毒的致病性以及感染是否限于一个黏膜表面或是否能够产生全身性感染有关。

甲型流感病毒通过高突变率和基因组片段产生基因和抗原变异，使得该病毒能够快速改变并适应新宿主。事实上，这种情况可能会导致“新病毒”在新宿主中迅速达到地方性流行的程度。该过程还使病毒适应其新宿主，从而获得一定程度的宿主特异性。

在禽类中，这种屏障还未研究清楚，例如，适应鸡的病毒通常也会感染鹑鸡类和水禽等其他禽类。

可以使用扑杀、隔离和疫苗接种等方法控制流感。

2  流感病毒

流感病毒属于分节段RNA病毒的正黏病毒科，其中一种是甲型流感病毒。其他两种为人类流感病毒，包括乙型流感病毒和丙型流感病毒，这两种病毒往往只感染人类。

所有甲型流感病毒都有8个不同的基因片段，可编码至少10种不同的病毒蛋白。其中两种——血细胞凝集素（Haemagglutinin，HA）和神经氨酸酶（Neuramidase，NA）——用于流感病毒的分类，它们是H5N1等名称中H和N的来源。到目前为止，我们已知18种HA蛋白，因此流感病毒有18种亚型，分别为H1至H18。

3  病毒形态学

流感病毒的形态变化很大，从球形到长丝状，后者在病毒的临床分离株中最常见。

4  血细胞凝集素（HA）和神经氨酸酶（NA）

血细胞凝集素蛋白是一个三聚体，其流感病毒外部脂膜上有明显刺突，而神经氨酸酶蛋白的形状则更像球形，并且从表面脂膜伸出。

如前所述，这些HA和NA蛋白质为亚型分类提供了基础。目前已知有18种H亚型，它们被命名为H1至H18。

禽流感病毒中最常见的H型是H1、H3、H5、H7和H9。家禽中已发现H1到H13。野生鸟类中已经发现H1至H16，不包括H14。H1至H10（不包括H8）也已从哺乳动物中分离出来，而H17和H18仅在蝙蝠中发现。

5  流感病毒的分离

流感病毒可以在鸡胚中生长，最近开始使用细胞培养物。

然而，对于禽流感病毒，迄今为止最流行的分离方法仍是使用鸡胚，并且鸡胚的优选日龄为9 d～11 d，以便将测试材料接种到尿囊腔中。这种方法的一大优点是它可以用于高致病性禽流感（High Pathogenic Avian Influenza，HPAI）病毒和低致病性禽流感（Low Pathogenic Avian Influenza，LPAI）病毒。

一些火鸡禽流感病毒株在鸡胚中生长不良。这些病毒株不会凝集鸡红细胞，因此如果使用血细胞凝集抑制试验对这些菌株进行血清学筛选，则试验应该使用火鸡或豚鼠红细胞，而不是鸡红细胞。

6  流感病毒的命名

为了给每种分离的禽流感病毒一个独特的名称，人们使用了一种具有6个组分的系统给它们命名。

①抗原类型（A、B、C或D）。

②分离病毒的宿主物种。

③分离的地理区域。

④唯一的参考标识码。

⑤分离的年份。

⑥其H和N亚型。

例如：

A/鸡/加拿大/AVFV2/2004/H7N3

A/鸡/普埃布拉/8623-607/1994/H5N2

A/燕鸥/南非/-/1961/H5N9

7  临床疾病

家禽上的流感感染可能无症状，但是它们通常会导致生产损失和各种临床症状，在受影响的鸡群中可以造成从轻微到严重的临床症状。

临床表现与引起呼吸道和/或肠道黏膜感染以及引起全身感染的禽流感病毒相关。

感染黏膜表面的病毒通常被称为LPAI病毒，通常它们的感染不会造成严重的死亡率。HPAI病毒通常与高死亡率有关，并且在历史上，其通常被称为禽瘟。

LPAI病毒尽管可以产生无症状感染，但它们通常与呼吸道感染有关，其严重程度可以从轻微到严重。临床可见采食量和饮水量下降，种鸡或蛋鸡群中经常会发生产蛋量下降。这些可能会对鸡群造成严重的影响，永远无法恢复到原来的生产状态。该现象经常出现在被猪流感病毒感染的火鸡种鸡群中。

在大型鸡群中，LPAI感染可以通过鸡群缓慢地传播，死亡率低但会持续升高。或者，LPAI感染可能会导致高死亡率，尤其是在环境管理不善以及有继发感染时。

LPAI偶尔会引起内脏器官的特定病变。

8  HPAI和LPAI病毒的特征

HPAI病毒仅限于H5和H7亚型。大多数亚型是LPAI病毒，这些亚型很少突变为HPAI病毒。据认为，HPAI病毒来源于在家禽中长时间流行的LPAI病毒。

例如，1983年LPAI在美国H5型禽流感暴发之前在宾夕法尼亚家禽群中流行了数年。1994年墨西哥的H5型禽流感和5年后的意大利H7型禽流感暴发也出现了类似情况。

LPAI病毒转变为HPAI病毒所需的选择压力尚不清楚，但该过程的关键部分是病毒可在鸡和火鸡等鹑鸡中复制。

人们通常认为野生禽类不是HPAI病毒的宿主。然而，人们数次在野生禽类上发现了该病毒，例如1961年在南非燕鸥中暴发该病。在过去的十年中，H5N1的三次大规模暴发都与野生禽类有关

9  致病性——宿主和病毒株因素

HPAI病毒会导致4～6周龄无特定病原体鸡出现较高的死亡率，否则根据定义，不能将其命名为HPAI。仅仅鉴别为HPAI并不意味着它会导致其他物种发病，还需要用HPAI病毒对这些物种进行攻毒试验来定义。

其中研究得最广泛的是1997年从香港分离到的鸡H5N1型HPAI。

香港97毒株在所测试的所有鹑鸡中都造成了高死亡率，包括鸡、火鸡、野鸡和鹌鹑。在其他物种的试验中，引起的症状不太严重，或者在某些情况下，没有临床症状。

一些动物受到挑战时，它们表现出与大脑中病毒复制位点相关的神经系统症状。另一方面，鸭表现出有限的呼吸道病变，并且没有任何疾病症状。

1997年至2001年间分离的H5N1病毒可以感染两周龄的鸭，但不会导致任何发病率或死亡率。从2002年的一些分离株开始发现有死亡率，最近获得的分离株具有100%的死亡率。

对于哺乳动物（包括人和猪），自然感染的H5N1型HPAI与严重的非典型肺炎有关，这表明有呼吸道感染。其他哺乳动物，包括雪貂、猫和狗，可能会发生病毒的系统传播，这会加速死亡。

人们很难对所有物种中HPAI的致病性进行描述，随着病毒的变化，它引起的疾病的临床表现也会发生变化。

10  诊断方法

流感病毒的检测和诊断可能由于存在疾病/感染，但没有明显的或特征性临床症状而变得复杂。因此，我们需要求助于实验室检测。这可能包括寻找抗体或病毒，其取决于目标。对于这两种类型的检测，可做进一步检测以确认病毒亚型或病毒的其他生物学特征。

检测方法在很大程度上是一致的。

11  样本类型

口咽或气管拭子和泄殖腔拭子是最常检测的样本。也可以检测组织样本，但它们不是检测LPAI病毒的最佳样本。

口咽拭子包括擦拭后鼻孔裂隙。这比气管拭子更佳，因为：

● 可以从鼻窦获取材料;

● 对禽类的侵入性较小;

● 不需要较高的操作技能;

● 试验显示，就获取流感病毒而言，它们的效果相当于气管拭子。

在大多数情况下，最好的方法是采用口咽拭子和泄殖腔拭子。然而，作为一般规则，水禽中的LPAI病毒具有更高的肠道复制趋势，因此病毒将更多地通过泄殖腔排毒，这意味着可以使用泄殖腔拭子做更多的检测。相反，在鸡和火鸡中，LPAI病毒的复制更多发生在呼吸道中，因此会有较多的病毒脱落到呼吸道，这意味着口咽拭子更合适。

对于野生禽类，将口咽拭子和泄殖腔拭子放在同一试管中可以增加阳性样本的数量。通常可以成功地合并拭子。

12  野生禽类感染

自20世纪60年代初从南非常见燕鸥中分离出禽流感病毒以来，各种研究大大增加了我们对这种病毒在野生禽类中的认识。

这种情况随着在香港的野生禽类中分离出H5N1型HPAI并随后扩散到非洲和欧亚大陆之后变得更加重要。

13  宿主范围

禽流感的宿主从野生水禽（鹅、鸭、天鹅等）到黑腹滨鹬、红脚鹬和矶鹞，到燕鸥、海鸠和海鸥，到鸽子、野鸡、鹧、乌鸦、莺和啄木鸟，等等不一而足。物种易感性的信息非常有限。而病毒的感染能力、病毒排毒的持续时间和主要的排毒途径会出现物种间差异。

14  禽流感的储存宿主

现在公认的是，感染哺乳动物和禽类的禽流感病毒来自野生禽类储存宿主。野生禽类储存宿主是为维持流感病毒提供工具的多种群系统。随着该病毒转移到新宿主群体并在其中进化，储存宿主可能会发生变化。

有时储存宿主可以重叠。例如，尽管绿头鸭是野鸭储存宿主的重要组成部分，但它们也是维持禽流感相关问题的最重要的物种，而且绿头鸭通常与许多种类的鸭共同生活。一些人认为，鸭中禽流感病毒的维持可能取决于不迁徙的、当地的和远距离迁徙的亚种群之间的相互作用。

15  病毒种群的变异

证据表明，H13和H16型禽流感可以在海鸥群中维持。在鸭、海鸥和滨鸟群中，流行的空间和时间变异发生相当一致。

这些变异可能与越冬或繁殖区、当地禽类种类组成和行为以及影响禽类分布的不同环境因素有关。例如，人们发现夏末和初秋的病毒高峰与当年孵化的大量易感禽类迁徙前的聚集有联系。

16  传播周期

禽流感病毒主要通过粪-口传播。在鸭中，病毒复制以肠道为中心，导致粪便排出高浓度的病毒。因此，受污染的水和沉积物可能是感染源。

绿头鸭可通过鼻内、气管内、眼内和腹腔内途径感染，所有这些都可能是因为与受污染的水发生了接触。受禽流感病毒污染的地表水或地下水可能是禽群长期或短期的感染源。

可以影响感染、病毒排毒和与环境接触的可能性的宿主因素多种多样。尽管存在许多野生禽类易感染禽流感病毒，但病毒主要的排毒途径、排毒持续时间和感染病毒的数量却因种类而异。

例如，野鸭通常可以排毒28 d，但也有例外，在野生绿头鸭的实验性感染期间，病毒排毒的持续时间通常不到14 d，大多数病毒在感染后2 d～6 d排出。

这种较短的排毒期可能与防止反复感染禽流感病毒有关。绿头鸭的田间排毒期估计为3.1 d～8.3 d。

17  环境因素

禽流感病毒的环境持久性对这些病毒的传播和维持的重要性尚不完全清楚。

试验研究表明，禽流感病毒可以在粪便或水中存活很长一段时间。较低的水温、中性pH和低盐度是增强病毒活性的重要因素。

温度波动、反复冻融和氨都会缩短感染期。

18  病理学

鸭在感染大多数禽流感病毒（包括HPAI病毒）时，只会发生亚临床或非常轻微的症状。然而，一些亚洲H5N1型HPAI病毒可以在全身复制并导致严重的症状和死亡。最近，与H5N1型禽流感密切相关的H5N8型禽流感也导致了死亡。

患病和感染的无症状鸭都会排出大量的禽流感病毒。

禽流感病毒具有高度的宿主适应性。通常在感染时，这些病毒在野生水禽胃肠道的上皮细胞中复制并产生亚临床感染。有时，病毒会从野生水禽传播到家禽，在家禽上產生亚临床感染或临床感染，其特征是呼吸道症状，在蛋鸡上会造成产蛋量下降。这些通常是LPAI病毒。有一些H5和H7型LPAI病毒，在家禽中进行循环后会发生突变产生HPAI病毒。这些HPAI病毒会诱发严重的全身性疾病，在鸡和鸭的皮肤、内脏和大脑中造成炎症和坏死。

在田间，禽流感感染的临床表现受多种因素的影响，包括病毒株、宿主种类和年龄、宿主性别、并发感染、获得性免疫环境因素等。

暴露后有4种可能的结果——无感染、无症状感染、轻度症状或出现死亡的严重症状。

当HPAI病毒从水禽传播到家禽时，病毒会变异成一种更具呼吸系统趋向性的毒株。

19  毒力的遗传决定

病毒的毒力是其引起疾病的能力，它由病毒生长、侵入、感染易感细胞、逃避免疫系统和能够引起细胞损伤的能力决定。

这些能力由病毒基因组中单独的毒力基因编码。禽流感病毒的致病性是多基因性状，其影响宿主和组织趋向性、复制效率和免疫逃避机制。