何文婧， 高志琴， 陈 健， 任弘谨， 杨 虹， 蔡 晴， 杨连娟

（上海市皮肤病医院，上海 200050）

荧光染色剂Calcofluor White（CFW）能与真菌细胞壁的纤维素、几丁质和其他含β-1，4-糖苷键的碳水化合物紧密结合[1]，可吸收紫外光，使菌丝和孢子发出明亮的荧光，在荧光显微镜下真菌轮廓与黑暗的背景对比明显。国外实验室早已将荧光显微镜用于真菌性角膜炎等疾病病原真菌的检测[2]，而国内实验室由于早年缺乏荧光显微镜，一直沿用KOH湿片镜检法加真菌培养法来检测真菌。但真菌培养及形态学检测耗时长，传统KOH湿片镜检法假阳性率高，使这2种方法均不能满足临床需要。本研究对疑似真菌感染患者的临床样本同时进行了KOH湿片镜检法、CFW荧光染色法和真菌培养法检测，以评价CFW荧光染色法检测疑似真菌感染的临床价值。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取上海市皮肤病医院门诊疑似真菌感染患者共155例，其中男79例、女76例，年龄（42.0±17.6）岁。采集腹股沟、指（趾）甲、头、手、足、胸、龟头包皮等部位的样本和白带等。每例样本分别采用KOH湿片镜检法、CFW荧光染色法和真菌培养法检测。在进行真菌培养时，每例样本接种于2管沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂培养基（sabouraud dextrose agar，SDA）上，26 ℃培养2～3周。

1.2 试剂

荧光染色剂CFW购自石家庄博洋生物科技有限公司（批号20160613）。溶液A主要由荧光增白剂、氢氧化钾和水组成，高浓度的荧光素与真菌细胞壁的主要成分几丁质相结合，标记荧光。溶液B为复染剂，由伊文思蓝和水组成，复染剂可降低样本组织的背景亮度，增加对比度，使荧光信号更加清晰。……