于天弘，Siva Bharath MERUGU＃，Hema NEGI＃，孙宋暄，丁云鹤，武正华*，李大伟，3**

（上海交通大学 1药学院，上海200240；2生物医学工程学院；3细胞工程及抗体药物教育部工程研究中心，上海200240）

前梯度蛋白2（anterior gradient2，AGR2）是蛋白二硫键异构酶（protein disulfide isomerase，PDI）家族的成员，具有促进蝾螈断肢再生［1］、皮肤伤口愈合［2］和在胰腺组织再生的过程中激活表皮生长因子受体信号通路等作用［3］。AGR2也是一种肿瘤相关蛋白，在乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌、肺癌、卵巢癌等肿瘤组织中过表达［4－8］。细胞内AGR2在肿瘤中与肿瘤增殖、存活、迁移、黏附、不良预后、耐药等特性息息相关［9－12］。另外，在肿瘤组织中，AGR2可以被分泌至细胞外并能在肿瘤病人的血液和尿液中被检测到［13－14］。细胞外的AGR2是肿瘤微环境中的重要参与者，已知的功能有导致前列腺基质细胞的程序性死亡［15］，影响上皮细胞的极性和黏附，引起上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）［16］，与血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）结合，增强 VEGF和 FGF形成二聚体的能力，继而促进血管内皮细胞和成纤维细胞向肿瘤组织迁移，引起血管生成［17］。这些特性都说明AGR2是一个潜在的抗肿瘤靶点。

本课题组通过杂交瘤技术制备了以AGR2为靶点的单克隆抗体，命名为18A4［18］。初步药效实验发现，18A4能够抑制AGR2表达阳性的乳腺癌细胞的生长和迁移［19］，通过抑制血管生成的功能减缓了SKOV3卵巢癌细胞的裸鼠移植瘤的生长［17，20］。但18A4的药理活性研究仍然存在拓展的空间。本研究运用两种自身不表达AGR2的黑色素瘤细胞，将AGR2蛋白和18A4同时作用于细胞，观察18A4抗体能否抑制细胞外AGR2引起的肿瘤细胞活性。……