杨璇，高菲，刘文君

（西南医科大学附属医院 儿科，四川 泸州 646000）

慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia，CML）是造血干细胞的恶性转化，其发病率为1～2/100 000[1]。随着CML病程的进展其化疗耐药性也随之增加，化疗失败是CML高死亡率的关键因素。因此，发现能提高治疗效果的新方法并且克服药物的耐药性具有重要意义。微小RNA（MicroRNAs，miRNA）是大小为18～25个核苷酸，进化高度保守的内生非编码小RNAs。其在肿瘤中异常表达，并且能作为癌基因通过结合目标mRNA的3'-UTR抑制mRNA的翻译或裂解目标mRNAs诱导其退化[2]。除了实体肿瘤，miRNA也在许多不同的血液恶性肿瘤中异常表达，如慢性淋巴白血病、急性髓系白血病、骨髓增殖性肿瘤。对CML，ROKAH等[3]发现与对照组细胞相比，下调K562细胞中的miRNA-31、miRNA-34a、miRNA-155及miRNA-564后，miRNA在CML发病机制中具有潜在的作用，miRNAs可能是CML治疗的新靶点[4]。大黄的药用成分是大黄素甲醚，曾被用作泻药，有护肝、抗炎及抗菌的特性。研究发现大黄素甲醚能够干预癌细胞的生理活动，其中包括细胞凋亡[5-6]，细胞生长周期[7]及转移[8]。然而，大黄素甲醚在血液恶性肿瘤中的作用尚未阐明。本研究将探讨miRNA-146a对CML细胞（K562/ADM）耐药性的影响以及大黄素甲醚对K562/ADM多药耐药性的逆转效应。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

人CML细胞系K562细胞和耐阿霉素细胞系K562/ADM（由中国上海生物化学与细胞生物学研究所细胞库提供），CCK-8试剂盒（购自中国碧云天公司），Annexin V-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒、增加通透性试剂盒（购自BD公司），Hoechst33258（购自美国Sigma公司），总miRNA提取试剂盒、TaqMan探针、逆转录试剂盒（购自美国Applied Biosystems公司），总RNA提取试剂盒（购自中国天……