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SIRT1沉默对人甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1生物学功能的影响

2018-04-13彭华童吴文艺张丽婷林建清余艺煌吴春林黄种心邱建龙

中国医科大学学报 2018年4期
关键词:检测

彭华童,吴文艺,张丽婷,林建清,余艺煌,吴春林,黄种心,邱建龙

(1. 福建医科大学附属第二医院肿瘤外科,福建 泉州 362000; 2. 解放军第一八零医院内分泌科,福建 泉州 362000; 3. 解放军第一八零医院病理科,福建 泉州 362000)

甲状腺癌是最常见的内分泌系统恶性肿瘤,其中甲状腺乳头状癌 (thyroid papillary carcinoma,TPC) 是最常见的一种类型,占所有甲状腺癌的80%~85%。虽然TPC的总体预后较好,但仍有约10%的患者可能死于该病[1]。近年来,国内外的调查结果显示甲状腺癌的发病率呈显著增加趋势。然而,肿瘤的发生、发展是一个多环节、多因素、多阶段的复杂过程,甲状腺癌发生的原因及机制目前尚不清楚,绝大多数观点认为基因突变或表达异常在TPC的发生中起重要作用。

沉默信息调节因子2相关酶1 (silent information regulator 2 homolog 1,SIRT1) 是Sirtuins 家族中的一种依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD+) 的Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶[2],它可使多种蛋白质的赖氨酸残基发生去乙酰化,在肿瘤的发生发展中有着广泛的生物学功能[3]。HERRANZ等[4]研究发现,在磷酸酶和张力蛋白同源物 (phosphatase and tensin homolog,PTEN) 基因缺乏的小鼠甲状腺癌中,SIRT1蛋白异常升高,原癌基因c-MYC被激活,c-MYC蛋白表达上调。吴文艺等[5-6]研究证实,SIRT1在TPC组织中高表达,可能与TPC的发生、发展及淋巴结转移有关。

本研究利用脂质体法使SIRT1siRNA转染体外培养的人TPC细胞株TPC-1,用qRT-PCR方法检测siRNA的干扰效率,筛选出干扰效率最强的siRNA,并用Western blotting验证SIRT1蛋白的表达,利用CCK8法、Hoechst染色法、流式细胞仪及β-半乳糖苷酶染色法检测转染细胞的增殖抑制率、凋亡、周期与衰老的变化,旨在探讨SIRT1沉默对人TPC细胞株TPC-1生物学功能的影响。……

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