磷酸化P38在神经病理性疼痛大鼠背根神经节中的作用机制
2018-04-13解丽丽吕洪涛许瑞雪
解丽丽,吕洪涛,许瑞雪
(1. 大连市中心医院神经内科,辽宁 大连 116033; 2. 大连医科大学附属第一医院神经外科,辽宁 大连 116011)
丝裂素活化蛋白激酶 (mitogen activated protein kinase,MAPKs) 存在于细胞中,是在细胞信号转导通路中发挥重要作用的丝/苏氨酸蛋白激酶。P38蛋白是MAPKs家族中重要的一员,许多生理性与化学性刺激都能激活P38的磷酸化。JOHNSON等[1]研究发现,ERK、JNK、磷酸化P38(phosphorylated P38,p-P38)蛋白激酶所参与的细胞内信号转导通路在细胞增殖、分化、凋亡、神经元可塑性等多种生理病理过程中发挥重要作用。许力等[2]研究发现,脊髓中的P38与TNF-α活化,抑制P38磷酸化可以减少TNF-α,提示P38可能参与疼痛的中枢敏化。P38广泛存在于脊髓和背根神经节 (dorsal root ganglion,DRG) ,并在炎症反应中发挥着抗炎作用[3-4]。
慢性背根神经节压迫 (chronic compression of dorsal root ganglion,CCD) 模型是一种外周神经病理性疼痛模型,是研究外周神经不完全性损伤的常用动物模型,本研究检测CCD大鼠DRG中p-P38 表达情况,探讨p-P38在神经病理性疼痛大鼠DRG中的作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物及分组
18只SD大鼠 (160~180 g,雌性) 由大连医科大学附属第一医院动物实验中心提供。室温饲养,12 h照明/12 h黑暗,水与鼠粮自由食用。实验前大鼠要适应实验室环境1 h。动物使用遵照大连医科大学动物管理委员会要求。大鼠随机均分为3组:假手术组(sham组) 、CCD组、CCD模型SB203580给药组 (治疗组) ,每组6只。分别于术后14 d测完行为学取材。
1.2 试剂
P38抑制剂,4-(4-氟苯) -2-(4-甲磺酰苯) -5-(4-吡啶基) -1氢-咪唑 (SB203580,美国Sigma公司) ;内参β-actin抗体、p-P38抗体与P38抗体 (美国Cell Signaling公司) 。
1.3 CCD模型制备
大鼠腹腔注射l%戊巴比妥钠 (40 mg/kg) 麻醉后,用剃毛刀将腰背部的毛剃光,铺上纸巾暴露出手术野,沿着右侧脊椎从L2-5切开皮肤、分离肌肉。……
