张笑笑　徐　威　金　巍　陈　静　刘明丽　任传成

(复旦大学附属上海市第五人民医院神经内科　上海　200240)

缺血性脑卒中(ischemic cerebral stroke,ICS)是一种常见的脑血管疾病,具有发病率高、致死率高及致残率高的特点。我国每年新增约250万脑卒中患者,其中ICS患者接近70%[1]。重组组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)是急性ICS最有效的治疗药物[2]。然而,这种溶栓药物存在严格的治疗时间窗限制,仅有少数ICS患者能得到有效的治疗[3]。ICS的临床诊断主要借助CT和MRI,但影像学诊断并非绝对可靠,所以有必要寻找ICS生物标志物协助早期诊断。

蛋白质组学作为一种高通量筛选鉴定蛋白质的技术,为寻找ICS生物标志物提供了新的可能。虽然,脑卒中领域蛋白质组学的研究已经有多篇文献报道,但是脑缺血后脑皮层蛋白质组的表达变化研究甚少。本研究首次采用串联质谱标签(tandem mass tag,TMT)标记技术结合液相色谱串联质谱,探讨大鼠ICS后脑皮层蛋白质的动态表达变化,旨在通过定量蛋白质组学方法深入揭示脑缺血对皮层蛋白质表达变化的影响,为寻找ICS生物标志物及进一步阐明ICS的病理生理机制提供理论基础。

材 料 和 方 法

实验动物及分组42只清洁级成年雄性SD大鼠,体重280～330 g,由上海兽医研究所提供及饲养。分为假手术组(sham组,n=12)和脑缺血组(ICS组,n=30),ICS组按照缺血时间不同进一步分为缺血1、6、24、48 h (表1)。动物饲养及手术按照复旦大学动物伦理委员会实验动物规范执行。

模型构建及取材采用异氟烷麻醉,大鼠置于操作台上,行颈部正中切口并分离双侧颈总动脉,穿线待用。……