林英，王新波，焦玥明，郝慎文

（莱芜市动物疫病预防与控制中心，山东 莱芜 271100）

莱芜市是传统的蛋鸡养殖基地，蛋鸡养殖户大部分是从原来的家庭养殖逐步发展而来，养殖数量在1万～2万之间的占80%以上，大多采用机械化饲养，平时由家庭成员管理，不雇佣工人，只在注射疫苗雇佣防疫人员进行操作。由于目前蛋鸡场免疫的疫苗种类多、注射频次高，从事防疫的人员良莠不齐，而且一栋鸡舍少说也有上万只蛋鸡，一旦免疫达不到应有效果，带来的经济损失不可估量。所以免疫后抗体水平检测成为评估疫苗免疫效果和确定下次合适的免疫时间的重要依据。由于家庭养殖的局限性，很多蛋鸡场没有会采集血清的工作人员，不具备送检血清的条件，单靠各级畜牧部门到场到户采样监测，受到人员、时间的限制，远远满足不了各蛋鸡场的需求。外人进入鸡舍逮鸡采血的过程给鸡群带来较大的应激，且进入全封闭的鸡舍采样需要消毒、更衣等一系列准备工作，耗时耗力，有的养殖户怕交叉感染，采样后的鸡只不再放回原鸡舍而直接淘汰，造成很大的浪费。检测卵黄抗体采样简便，对鸡群无应激，可成批次进行检测，是蛋鸡养殖户乐于接受的检测方法。但是随着禽流感免疫毒株的不断变化，从H5N1Re-1一直到 H5N1Re-8，2017年秋季又改为H5N1Re-8+H7N9，注射疫苗后血清抗体和卵黄抗体的相关性到底如何，成为我们检测者和养殖户共同关心的问题。

我国在20世纪80年代就有用卵黄样本代替血清样本进行新城疫抗体检测的研究，一般来说，鸡的免疫球蛋白存在于血液中，并能通过血液到达卵黄中，所以血清抗体和卵黄抗体具有一定的相关性，但是卵黄的形成较血清有滞后性，所以在免疫后各个阶段相关性如何需要进行研究。

莱芜市动物疫病预防与控制中心为了更好的做好高致病性禽流感、新城疫的监测，为养殖户提供检测服务和免疫方案的指导，防范重大动物疫病，保障蛋鸡养殖业的健康发展。于2017年9～12月在蛋鸡养殖密集的莱芜口镇、羊里镇等地区，选择了30家养殖场（户）进行试验。给这些鸡群注射禽流感、新城疫等疫苗后采集血清和鸡蛋，对3个月的免疫抗体情况进行检测，以便找出血清抗体与卵黄抗体的相关性，为今后检测数据的的分析提供基础资料。

1 试验方法

选择30家日龄在180～200d的蛋鸡养殖场（户），每10家一个组，分别注射禽流感H5N1Re-8+H7N9、新城疫和禽流感H9油乳剂灭活疫苗。注射疫苗后隔 15、30、40、50、60、90d 每家对应采集30份血清和鸡蛋进行抗体检测，检测内容为新城疫、禽流感H5Re-8、禽流感H7N9、禽流感 H9抗体，检测方法为血凝抑制试验。取每次检测的平均值进行比较和分析。

检测滴度平均值统计见表1、表2、表3、表4。

表1 新城疫（单位log2）

表 2 禽流感 H5Re-8（单位 log2）

表 3 禽流感 H7N9（单位 log2）

表 4 禽流感 H9（单位 log2）

2 结论与分析

由表1、表2、表3、表4可以得出以下结论：

2.1 新城疫、禽流感血清和卵黄抗体在鸡体内的消减程度并不相同，相关性也有一定的差异。新城疫油苗注射后40d抗体水平达到最高值，在此之前卵黄抗体和血清抗体平均值相差2个滴度，40～60d基本维持最高值，卵黄抗体和血清抗体平均值相差1个滴度；禽流感H5Re-8注射后40d达到最高值，在此之前卵黄抗体和血清抗体平均值相差4～5个滴度，50～60d逐渐下降，血清抗体和卵黄抗体相差3～4个滴度；禽流感H7N9注射后40d达到最高值，在此之前卵黄抗体和血清抗体平均值相差数为 4.75、3.75、1，40～50d 维持原有抗体水平，抗体相差1个滴度，60d后逐渐下降，抗体相差1.5个滴度；禽流感H9注射后15d检测时已达峰值并在峰值维持很长时间，直到90d未检测到下降，估计和禽流感H9毒株特性有关，检测期间抗体一直相差一个滴度。检测卵黄抗体时应根据以上规律增加滴度，才能正确反映血清中抗体滴度。

2.2 高致病性禽流感在卵黄中抗体上升较慢，数值上与血清抗体差别较大，检测时应引起注意。

2.3 新城疫、禽流感H5Re-8、禽流感H7N9抗体水平在血清和卵黄抗体中40d左右达到峰值，60d开始下降，一个月大致下降1.5个滴度。建议养殖户4个月左右注射一次油苗以维持机体内较高抗体水平。

2.4 禽流感H9抗体水平维持时间较长，可适当降低免疫注射频次，节省养殖成本。

本次试验鸡群不是SPF鸡群，在实验开始前做过禽流感H5、H9、新城疫的基础免疫，禽流感H7N9为首次免疫，试验结果可能受到一定影响，仅供同行参考。