吴蕾,沈志勇,崔雪志,鲁守伟,许传田

(1.山东新希望六和集团有限公司，山东 济南 250100；2.临沂市临港区壮岗镇兽医站，山东 临沂 276615；3.山东省农业科学院畜牧兽医研究所，山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室，山东 济南 250100）

鸡场消毒是做好生物安全措施最关键的一个环节，消毒效果好坏直接关系到场外微生物能否传入到鸡场，鸡场外消毒保证场外病原进入鸡场机会大大降低，鸡舍内消毒能保证鸡舍内已经存在的病原微生物控制在一定范围内，不致引起疾病爆发。因此消毒预防和控制畜禽传染病的重要措施之一[1-5]。

由于市场上消毒剂种类繁多，消毒效果各异，如何选择适合自己养殖场的消毒剂是养殖场在生产过程经常遇到的一个实际问题。本研究拟通过定量杀菌试验比较过硫酸钾复合粉、复方酚溶液、复方戊二醛溶液、10%聚维酮碘、火碱对细菌的杀菌效果，并结合消毒剂的价格，以及这5种消毒剂的消毒特点进行综合分析，为养殖户筛选消毒剂提供参考。

1 材料和方法

1.1 材料 8.5%的生理盐水、营养肉汤（陆桥）、平板计数琼脂（陆桥）、过硫酸钾复合粉、复方酚溶液、复方戊二醛溶液、10%聚维酮碘、火碱（纯度99%）、棉签、18mm×180mm 试管（带塞子）、250ml锥形瓶、100μl吸头、1ml吸头、10～100μl单道移液器、100～1000μl单道移液器、苏净牌超净工作台、一恒牌37℃恒温培养箱、酒精灯、申安牌高压灭菌锅等。

1.2 方法

1.2.1 细菌的培养 使用灭菌棉签在种鸡养殖场的舍内墙壁上采集细菌，立即将棉签放入灭菌的营养肉汤中，放入37℃恒温培养箱中培养24h。

1.2.2 计算营养肉汤中的细菌的含量 室温条件下（25℃），将培养24h的肉汤在超净工作台中用灭菌的生理盐水进行10倍系列稀释，稀释到107倍。分别从104～107的稀释肉汤中，依次取0.1ml菌悬液，加入平板计数琼脂，摇匀，凝固后倒置放入37℃恒温培养箱培养24h，计数菌落总数。

1.2.3 五种消毒剂对细菌的杀菌效果 室温条件下（25℃），根据厂家推荐浓度设置消毒剂稀释比例（见表1）。将过硫酸钾复合粉、复方酚溶液、复方戊二醛溶液用蒸馏水分别进行1:200、1:400、1:600、1:800、1:1000 倍稀释；10%聚维酮碘稀释至0.5%、1%、2%、4%、5%（以碘含量计算）；火碱稀释至1%、2%、4%、5%、6%。震荡混匀后，取系列稀释的不同种类的消毒剂与菌悬液按25:1（5m l消毒剂：0.2ml菌液）比例混合，经不同时间反应后（30min、1、3、5、10、12、24h），将 0.1m l的细菌消毒剂混合液加入灭菌平皿中，倒入灭菌平板计数琼脂，混匀，凝固后倒置放入37℃恒温培养箱培养24h，观察结果，计算菌落总数（整个处理过程在超净工作台中无菌进行）。实验过程中设置灭菌蒸馏水阳性对照（灭菌蒸馏水：菌悬液=25:1）和阴性对照（灭菌蒸馏水）。

表1 厂家推荐消毒剂使用浓度

2 结果

2.1 营养肉汤中细菌含量的结果 由表2计算出，菌悬液中含菌量为3.1×107CFU/ml。

表2 菌悬液中细菌含量

2.2 五种消毒剂对细菌的杀菌效果 菌落计数结果表明：复方戊二醛溶液稀释至1000倍、火碱稀释至1%、10%聚维酮碘稀释至0.5%、过硫酸钾复合粉稀释至800倍、复方酚溶液稀释至600倍，反应30min杀菌率可达100%；阳性对照菌落多不可计，阴性对照细菌为0（见表3）。在实验室条件下，复方戊二醛溶液、火碱、10%聚维酮碘、过硫酸钾复合粉、复方酚溶液推荐比例分别是1:1000、1%、0.5%、1:800、1:600。

2.3 五种消毒剂使用成本 根据本实验得出的五种消毒剂的推荐比例和市场价格计算其使用成本，成本由低到高：火碱＜复方戊二醛溶液＜复方酚溶液＜过硫酸钾复合粉＜10%聚维酮碘，见表4。

表4 五种消毒剂使用成本

3 讨论

试验的五种消毒剂中最经济实惠的是火碱，对病毒和细菌的杀灭作用均较强，高浓度可杀灭芽孢，但具有腐蚀性，主要用于养殖场地面、墙壁等的消毒；复方戊二醛为醛类消毒剂，无腐蚀性，高效广谱[6]，作用迅速，但有芳香气味，不易受环境酸碱度及有机物影响，对细菌和真菌均有杀灭作用，对芽孢和无囊膜病毒作用弱，其抗菌活性不受低温影响，化学性质稳定，主要用于鸡舍、器具、喷雾等消毒；复方酚为酚类消毒剂，对皮肤和粘膜具有刺激性和腐蚀性，对大多数不产生芽孢的繁殖型细菌和真菌均有杀灭作用，但对芽孢和无囊膜病毒作用不强，其抗菌活性不受低温影响，化学性质稳定，主要用于禽舍表面、外部环境、器具、设备等消毒；过硫酸钾复合粉为过氧化物类消毒剂，可以杀灭各种病原微生物，并不受有机物影响，其代谢产物不会对人类和环境带来影响，主要用于禽舍、空气、饮水、畜禽等消毒；聚维酮碘为碘制剂类消毒剂，对细菌、病毒、真菌具有良好的杀菌效果，具有高效广谱的特点，但使用成本较高，主要用于带鸡消毒、饮用水、鸡舍、场地、皮肤、粘膜等消毒[7-10]。

表3 五种消毒剂不同反应时间后菌落计数

本实验结果是在实验室条件下得出的数据，而在畜禽养殖场使用消毒剂消毒会受到消毒对象、有机物、温度、作用时间、生物膜、污染物等因素的影响，因此畜禽养殖场使用消毒剂消毒时需根据消毒对象选择适宜类型的消毒剂并适当调整消毒浓度，以期达到较好的消毒效果。

本研究为养殖场正确筛选消毒剂种类以及消毒剂的使用浓度提供了理论数据。

[1] 陈吕华，沈明亮，云麟.重视畜禽圈舍及环境消毒是畜牧业健康发展的关键[J].中国兽医杂志，2010，46(1)：86-87.

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[4] 孙秀如,卢永胜,张梅芳,等.如何建立种鸡场的生物安全体系[J].中国家禽，2008,11(2)：43-44.

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[6] 徐利平，陈小萍.戊二醛消毒剂的安全性与临床应用[J].中国消毒学志，2005，22(1)：96-98.

[7] 王安,范伟杰,赵庆枫,等.不同消毒方法对胚蛋消毒效果和孵化成绩的影响[J].畜牧与兽医，2013，45(7)：52-54.

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