彭亮权，许 鉴，周 勇，陈 康，李 瑛，陆 伟，朱伟民，王大平

作为最常用的金属材料之一，钛及其合金被广泛应用于骨科领域，机械性能优异，骨接触相容性良好。钛铌合金是一种新型骨科植入物材料，具有无毒性、抗腐蚀性良好等特点[1]。本研究自行设计多孔钛铌合金试件，观察体外兔骨髓间充质干 细 胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）与复合骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）、未复合BMP的金属试件共培养后分化生长的情况，分析多孔钛铌合金试件的细胞相容性，探讨BMP对其成骨活性的影响，从而为钛铌合金植入材料的研究提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选取3～4月龄健康新西兰纯种大白兔4只（实验动物使用许可证号：SYXK2015-0106），体重2.5～3.0 kg，雌雄不限，以颗粒干饲料及间断青饲料喂养。

1.2 主要实验材料和仪器

1.2.1主要实验材料 FXNb-1钛铌粉（Ti-25Nb，株州硬质合金厂）、聚乙烯醇（PVA，天津光复精细化工研究所）。

1.2.2主要实验试剂 DMEM/F12培养基、胎牛血清、胰蛋白酶（Gibco公司，美国）；透明质酸酶、0.1%胶原酶Ⅱ（Sigma公司，美国）；PBS液（北京中杉金桥生物技术有限公司）；水溶性rhBMP-2（pH值7.25～7.40，纯度95%，上海环亚生物科技有限公司）；骨钙素放免分析试剂盒（中国原子能科学研究院）；碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）。

流式细胞检测抗体CD44（赛业生物科技有限公司）、CD29（eBioScience公司，美国）、CD34（北京博奥森生物技术有限公司）；荧光标记物选用PE荧光染料，抗体采用羊抗兔单克隆抗体（Abcam公司，英国）。

1.2.3主要实验仪器 倒置相差显微镜（Olympus公司，日本）、JSM-6050型LV扫描电子显微镜（日本电子株式会社）、IB-5离子溅射仪（EiKO公司，日本）、GS-15R超净工作台（Beckmen公司，美国）、流式细胞仪（Becton Dickinson公司，美国）。……