◎ 梁玉博

（信阳市食品安全监督所，河南 信阳 464000）

酶联免疫吸附试验是基于免疫酶特点的免疫测定方法，其在使用过程中具有敏感度高、方便快捷、准确度高等优良特点。在单克隆抗体技术发展过程中，免疫试剂盒测试技术逐渐呈现了商业化的特点。食品问题不仅与人体健康息息相关，而且对国计民生具有一定的影响，受到了政府及相关专业人士的极大关注。因此，酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用具有非常重要的意义。

1 酶联免疫吸附试验检测流程

1.1 样品预处理

酶联免疫吸附试验在检测过程中，一般需要一定的样品预处理。预处理可能会在不同程度上破坏食品的内部结构，为了避免过程分析物质提取出现问题，可采用100%的水、甲醇、丁醇混合物物质，按75∶25∶5的比例提取物质。在特殊情况下，也可以采用超临界萃取技术利用液相甲醇改性过的二氧化碳，结合三元混合溶剂的应用，最大程度地降低酶联免疫吸附试验前期分析物质处理的损失。

1.2 抗原合成及抗体选择

在小分子物质检测过程中，由于其自身缺乏免疫抗原的特点，需要应用免疫原性载体蛋白。对于半抗原改性环节，可综合考虑偶联比、位点、偶联剂等因素，选择相应的偶联载体蛋白结合位点，然后在相应催化剂的作用下合成完全抗体。而在抗体选择环节可根据具体检测项目，结合效价、稳定性、交叉反应等因素，确定相应的抗体偶合物。

1.3 酶联免疫吸附试验方法选择

在食品安全检测过程中，不同的检测项目所需的检测方法也有所区别，如直接竞争酶联免疫法、间接竞争酶联免疫检测、抗原抗体复合物免疫法等。……