从热敏通道TRPV1探讨蛇床子提取物的作用机制❋

2018-02-13安致君刘珍洪汪文来陶旭光韩雪珍吴丹桐赵凯维赵红霞

中国中医基础医学杂志 2018年12期

关键词：癫痫

安致君，刘珍洪，于峥，汪文来，陶旭光，高蔚，郭蓉，殷茵，韩雪珍，吴丹桐，赵凯维，，赵红霞Δ，杨桢Δ

(1. 北京中医药大学,北京 100029； 2. 中国中医科学院中医基础理论研究所，北京 100700；3. 美国德克萨斯大学健康科学中心综合生物学及药理学系，休斯顿)

蛇床子最早收录于《神农本草经》，具有数千年的医疗实践应用，别名野茴香、野胡荽，为伞形科植物蛇床的干燥成熟果实，具有浓郁的芳香气息。其性味辛、苦、温，具有温肾壮阳、杀虫止痒的功效[1]，临床上用来治疗阴部瘙痒、痹症、湿疹、阳痿、宫寒不孕等。热敏通道(TRPV1、TRPA1和TRPM8等)是自然界许多芳香物质的分子靶点，它与温热感有关，也与瘙痒和疼痛密切相关。许多辛味中药如生姜(辛、微温)、吴茱萸(辛、苦，热)、葱白(辛、温)、羌活(辛、苦，温)等含有TRPV1的激动剂[2-3]，部分TRPV1/A1/M8的激动剂已经在蛇床子中存在。蛇床子部分药效的发挥可能是作用于热敏通道TRPV1路径实现的。本研究以蛇床子提取物(水提和醇提)为研究对象，结合电生理膜片钳技术，在瞬转了人TRPV1的HEK293细胞上测试其能否活化或抑制TRPV1，以探讨蛇床子发挥药效作用的分子靶点。

1 材料与方法

1.1 药品及试剂

中药蛇床子(北京同仁堂东四药店)，TRPV1 plasmid(Origene，RC217653)，质粒GFP(北京爱思益普)、DMEM cell culture medium、Fetal Bovine Serum、penicillin/streptomycin(Gibco)、Lipofectamine2000(invitrogen)、Capsaicin、DMSO、Sodium chloride、Potassium chloride、Cesium chloride、EGTA、HEPES、Magnesium chloride hexahydrate、D-glucose、Calciumchloride(Sigma)。

1.2 仪器

300克密封型摇摆式粉碎XL-06B(广州旭朗)、旋转蒸发器RE-52(上海虹昕)、数显恒温水浴锅HH-6(常州润华)、SHZIII型循环水真空泵(上海亚荣)、EPC-10 Quattro膜片钳放大器(Heka)、PatchMaster数据获取软件(Heka)、P-97拉制仪器(Sutter Instruments)、IGOR-Pro分析软件(WaveMetrics Inc)等。