心康冲剂基于调控PTEN-AkT-MMP-2蛋白表达抗心肌纤维化研究❋
2018-02-13刘蓉芳张杼惠吴玲娇聂孝平刘建和毛以林
刘蓉芳,孙 玲,张杼惠,杨 婷,吴玲娇,聂孝平,刘建和,毛以林Δ
(1. 江门市五邑中医院,广东 江门 529000; 2. 湖南中医药大学第二附属医院,长沙 410005; 3. 湖南中医药大学第一附属医院,长沙 410007)
心康冲剂是我院心内科临床效方,前期实验证明心康冲剂具有抗肾上腺素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)作用,能改善心脏病理结构,保护心肌细胞,提高心功能作用[1]。
心肌纤维化(myocardial fibrosis MF)是心肌正常组织结构中胶原纤维过量积聚导致胶原浓度显著升高或胶原成分发生改变的病理现象,是心功能不全的重要病理因素之一。定位于人类第10号染色体[2]的磷酸酶及张力蛋白同源基因PTEN,对成纤维细胞生长发挥着重要的作用,实验证明PTEN在心肌纤维化的病理过程中起重要作用。PTEN通过水解PIP3第3位磷酸基团对PI3K/AkT通路发挥抑制作用[3],故PTEN基因缺失可激活AkT,从而诱导心肌成纤维细胞MMP表达升高[4],引起心肌纤维化。探讨中药治疗慢性心衰、抗心肌纤维化的效用机制,有利于指导临床并提高临床疗效。因此本实验欲探索心康冲剂抗心肌纤维化的机制,现报告如下:
1 材料
1.1 实验动物
湖南斯克达实验动物有限公司提供90只SPF级SD大鼠(实验动物合格证号43004700025095),体质量150~180 g,雌雄各半。
1.2 药品及仪器
芪苈强心胶囊(石家庄以岭药业),心康冲剂(湖南省中医院中药制剂室制备),盐酸阿霉素(深圳万乐),MMP-2(美国proteintech,Rabbit),actin(美国proteintech,Mouse),AKT(美国CST,Rabbit),一抗试剂盒PTEN(美国proteintech,Rabbit),二抗HRP-conjugated Affinipure Goat Anti-Mouse IgG(H+L)(美国proteintech),引物(上海生工合成),LEICA DM LB2型双目显微镜(德国LEICA公司),Motic B5 显微摄像图像分析系统(麦克奥迪),便携式彩色多普勒超声仪(徐州大为DW-PF522)。……
