丹参通脉方对同型半胱氨酸诱导血管平滑肌细胞增殖、迁移的影响及其机制研究❋
2018-02-13魏群,曹珊
魏 群,曹 珊
(河南中医药大学, 郑州 450046)
动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一个多因素共同参与的过程,可导致心脑血管疾病的发生。随着年龄的增加,AS逐渐加重,目前已确定其与血栓形成、血管壁脂质浸润、血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和黏附分子介导的炎症反应密切相关,但其确切的发病机制尚未完全阐明[1]。研究显示,同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)可诱导血管VSMC增殖及迁移,VSMC的异常增生与迁移是AS发生过程中重要的病理基础[2]。我院自研的丹参通脉方(丹参、川芎、葛根、三七)具有调节血脂、降低血清Hcy水平的作用[3]。本研究探讨丹参通脉方 Hcy诱导的血管平滑肌细胞增殖、迁移的影响,旨在分析其作用机制,更好地为临床应用服务。
1 材料与方法
1.1 实验动物
SPF级SD大鼠,雌雄不限,购自郑州大学实验动物中心(合格证号SCXK 20090001)。
1.2 药物及试剂
丹参通脉方为我院自制方,由丹参10 g、川芎5 g、葛根10 g、三七6 g组成,经100 ml水煮,残液旋转蒸、冻干后得到。丹参、川芎、葛根、三七均经我院鉴定。Hcy为Sigma公司产品(批号C-7352); DMEM培养基和胎牛血清为四季青公司产品(批号20160315);蛋白提取试剂盒为上海哈灵生物公司产品(批号20160205);4’, 6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)为sigma公司产品(批号D8200);其他试剂均为国产分析纯剂试剂。
1.3 主要仪器
超净工作台(AIRTECH,苏州净化设备有限公司);精密电子天平(梅特勒-托利多);电动移液器(德国Eppendorff公司);Western电泳仪(美国伯乐);Western转膜仪(美国伯乐);低温高速离心机(Eppendorf 公司);CytomicsTMFC 500系列流式细胞仪(美国贝克曼库尔特);Transwell小室(Chemicon公司);转膜仪(Bio-Red公司)。
1.4 VSMC原代细胞培养和鉴定[2]
采用组织贴块法培养SD大鼠胸……
