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转基因大豆MON89788双重数字PCR通用定量检测方法的建立

2018-02-09冼钰茵吴希阳高东微

食品科学 2018年4期
关键词:大豆实验检测

刘 津,李 婷,冼钰茵,吴希阳,凌 莉,高东微,*

(1.广东检验检疫技术中心,广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室,广东 广州 510623;2.暨南大学理工学院,广东 广州 510632)

全球转基因作物种植已逾20 年,种植面积从1996年的170万 hm2增加了100 倍,达到了2015年的1.797亿 hm2,20 年来累计种植面积达到空前的20亿 hm2,相当于中国大陆总面积的2 倍[1]。随着转基因作物在全球范围内的大规模种植和消费,越来越多的国家和地区开始实施转基因产品标识管理制度。鉴于转基因作物在种植收割、生产加工和运输消费等过程中会出现不可避免的混杂,目前有60多个国家和地区对转基因产品标识设置了阈值,如欧盟规定合法转基因成分标识阈值为0.9%、非法转基因成分标识阈值为0.5%,巴西、澳大利亚、新西兰、沙特阿拉伯、以色列设定的标识阈值为1%,韩国设定的标识阈值为3%,日本和俄罗斯设定的标识阈值为5%[2]。这些国家和地区规定,产品中转基因成分含量低于阈值可以免于标识。转基因标识阈值逐渐成为大势所趋,我国相关部门也正在研究将其引入转基因安全管理体系当中。标识阈值的采用,为转基因安全管理带来更加科学合理的技术措施,同时也对转基因成分的精准定量提出了迫切而具体的需求。

在数字聚合酶链式反应(digital polymerase chain reaction,dPCR)技术出现以前,转基因成分的定量检测基本采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)技术[3-5],通过绘制不同浓度梯度标准物质与循环阈值之间的线性标准曲线,基于标准物质和待测样品的DNA提取与PCR扩增效率一致的假设,用待测样品qPCR的循环阈值对照标准曲线计算得到其中转基因成分的含量。……

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