李新鸣，孙冶 ，肖纯凌

（1. 沈阳医学院基础医学院病原生物学教研室，沈阳 110034； 2. 辽宁省环境污染与微生态重点实验室，沈阳 110034）

表达人源SOD的毕赤酵母重组子的构建

李新鸣1，2，孙冶1，2，肖纯凌2

（1. 沈阳医学院基础医学院病原生物学教研室，沈阳 110034； 2. 辽宁省环境污染与微生态重点实验室，沈阳 110034）

目的研究在毕赤酵母重组子中高表达有活性人源超氧化物歧化酶 （SOD） 方法。方法在毕赤酵母构建表达重组人源SOD，对培养时间、培养基中铜离子浓度和甲醇诱导条件进行优化，并初步纯化SOD。结果获得了5个稳定表达人源SOD的毕赤酵母重组子。色谱层析方法分离纯化重组子培养上清中的SOD。在培养48 h，培养基中铜离子浓度0.5%、甲醇诱导浓度1%时上清中SOD分泌量多，同时活力最好。结论建立毕赤酵母表达可溶性人源SOD的有效方法，实现了在毕赤酵母系统高效表达有活性人源SOD。为发酵生产人源SOD提供了研究基础。

毕赤酵母； 重组子； 人源超氧化物歧化酶

超氧化物歧化酶 （superoxide dismutase，SOD） 是一种能够催化有害的超氧化物通过歧化反应转化为氧气和过氧化氢的酶。1938年MANN和KEILIN［1］首次从牛红细胞中分离出一种蓝色的含铜蛋白质，直到1969年MCCORD及FRIDOVICH［2］发现该蛋白有发生歧化反应的功能。SOD是生物体内重要的抗氧化酶，广泛分布在动物、植物、微生物等体内。SOD具有特殊的生理活性，是生物体内清除自由基的首要物质，它能够平衡机体的氧自由基，从而避免体内超氧阴离子自由基浓度过高时引起的不良反应［2-3］。现代生活压力、环境污染、各种辐射和超量运动都会造成氧自由基大量形成。……