杨振丽 卞晓翠 冯海凉 刘玉琴

100005 北京，中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院 细胞资源中心

人源细胞系中6种主要病毒的检测

杨振丽 卞晓翠 冯海凉 刘玉琴

100005 北京，中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院 细胞资源中心

目的检测人源细胞系中EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)、乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)、丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus, HCV)、人乳头瘤病毒(Human pappilomavirus, HPV)、人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus, HIV)、人T淋巴细胞白血病病毒(Human T-cell leukemia virus, HTLV)的感染情况。方法对中心库藏常用的135株人源细胞系分别提取细胞DNA及RNA，采用PCR方法对细胞中的EBV、HBV、HPV、HIV、HTLV进行检测；采用RT-PCR方法对细胞中的HCV进行检测；利用透射电镜观察细胞中是否有病毒颗粒；对经PCR检测HPV核酸片段阳性的细胞系，再利用特异性引物采用PCR方法检测5种高危型HPV(HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV45)。结果经PCR检测，135株细胞系中，有4株细胞系(Daudi、Raji、EB-3、NCI-BL2009)中检测到EBV 核酸片段；2株细胞系(Hep3B、PLC/PRF/5)中检测到HBV核酸片段；7株细胞系(HeLa、HeLa 229、H1HeLa、HeLaS3、SiHa、Ca Ski、CNE-2Z)中检测到HPV核酸片段，其中2株(SiHa、Ca Ski)基因型为HPV16，5株(HeLa、HeLa 229、H1HeLa、HeLaS3、CNE-2Z)基因型为HPV18；1株细胞系(HUT 102)中检测到HTLV核酸片段；没有细胞系中检测到HIV核酸片段；经RT-PCR检测，没有细胞系携带HCV核酸片段。透射电镜下，病毒核酸阳性的细胞系中未观察到病毒颗粒，部分细胞系内可见病毒包涵体类似物。结论PCR或RT-PCR可以用于检测细胞系中病毒核酸的携带情况；细胞系中病毒核酸以基因组整合的形式存在。

细胞系在生命科学研究中是不可或缺的，其中大部分人源细胞系来源于患者组织，特别是肿瘤细胞系。病毒与某些疾病的发生发展密切相关[1-4]，如乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)与……