李桂云　黄忠宝　卞伯伟　胡丽

【摘要】 目的：探讨血必净联合盐酸氨溴索对百草枯中毒的大鼠急性肺损伤氧化应激的调节作用。方法：选择50只健康成年SD大鼠为研究对象，将其随机分为五组，空白对照组（A组）、单纯百草枯中毒组（B组）、血必净治疗组（C组）、盐酸氨溴索治疗组（D组）、联合治疗组（E组），每组10只，A组腹腔注射生理盐水25 mg/kg，其余四组采用腹腔注射20%百草枯溶液25 mg/kg诱导大鼠急性百草枯中毒模型，并给予C组、D组、E组大鼠相应治疗；检测比较各组大鼠肺组织中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性变化。结果：W/D比值、SOD活性及MDA、GSH水平组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。两两比较后发现C组、D组、E组W/D比值较B组明显下降，与A组相比差异无统计学意义（P>0.05），E组W/D比C组、D组低，差异有统计学意义（P<0.05）；C组、D组、E组SOD活性较A组明显低，显著高于B组（P<0.05），E组SOD活性比D组高（P<0.05），与C组比较差异无统计学意义（P>0.05）；C组、D组、E组MDA水平均比B组低，GSH水平均高于B组，差异有统计学意义（P<0.05），与A组相比差异无统计学意义（P>0.05），C组、D组、E组间两两比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：血必净与盐酸氨溴索均能降低百草枯中毒导致急性肺损伤大鼠体内的氧化应激反应，联合使用具有明确的疗效，可能存在协同作用，能为临床治疗提供一定参考。

【关键词】 血必净； 盐酸氨溴索； 百草枯； 急性肺损伤； 氧化应激

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.20.079 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2017）20-0155-02

百草枯是一种有机杂环类接触性除草剂，具有极强的毒性，可通过多种途径侵入机体引起中毒，对人体组织造成损伤，导致肺纤维化、肝坏死、心肾衰竭等，死亡率极高[1-2]，是除了有机磷中毒外最常见的农药中毒类型。目前关于百草枯中毒机制不明确，可能包括自由基损伤、炎症介质作用等方面。血必净是主要成分为红花黄色素A的中成药，具有清除氧自由基、降低内毒素、调节免疫的作用[3]；近期研究发现，盐酸氨溴索对百草枯中毒大鼠肺损伤具有保护作用，而两种药物联合应用对百草枯中毒大鼠急性肺损伤是否有协同保护作用的研究在国内尚属空白[4-5]。为此，本次研究通过建立大鼠百草枯中毒肺损伤模型，比较相关指标变化，初步探讨了血必净联合氨溴索对百草枯中毒所致大鼠急性肺损伤的作用，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

实验动物：50只健康成年的SPF级雄性SD大鼠。

药品：百草枯溶液（20%），生产公司：山东三元工贸有限公司；血必净，生产公司：天津红日药业股份有限公司，批准文号：国药准字Z20040033；AH，生产公司：浙江康恩贝制药股份有限公司，批准文号：国药准字H20123225。

仪器与试剂：台式高速离心机；超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）测定试剂盒；紫外可见分光光度计等。

1.2 实验方法

将选取的50只大鼠随机分为五组：空白对照组（A组）、单纯百草枯中毒组（B组）、血必净治疗组（C组）、盐酸氨溴索治疗组（D组），联合治疗组（E组），每组10只。A组大鼠腹腔注射生理盐水25 mg/kg，其余四组采用一次性腹腔注射20%百草枯溶液25 mg/kg，诱导大鼠急性百草枯中毒模型。造模后，B组大鼠仅腹腔注射生理鹽水10 ml/kg；C组大鼠腹腔注射血必净注射液10 ml/kg；D组大鼠腹腔注射盐酸氨溴索注射液10 ml/kg；

E组大鼠腹腔注射盐酸氨溴索注射液10 ml/kg和血必净注射液10 ml/kg。五组大鼠于相同环境下，以相同饲料喂养，连续给药培养7 d后行各项检查。

1.3 检测方法

取大鼠右肺上叶，置于子天平上称重，记为湿重，再移至70 ℃电热恒温干燥箱中干燥至恒重，后再次置于子天平上称重，记为干重，肺组织湿重/干重比（W/D）值=湿重/干重。

取大鼠左肺，组织研磨成匀浆后，置于离心机内，以3000 r/min转速离心10 min后，取上清液，测定SOD、MDA和GSH水平，严格按照试剂盒规定比色测定吸光度，计算MDA、GSH浓度及SOD活性。

1.4 统计学处理

本次研究均由SPSS 17.0软件包处理分析数据资料，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析和SNK-q检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

五组大鼠W/D比值、SOD活性及MDA、GSH水平组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。两两比较后发现C组、D组、E组W/D比值较B组明显低，与A组相比差异无统计学意义（P>0.05），E组W/D比C组、D组低，差异有统计学意义（P<0.05）；C组、D组、E组SOD活性较A组明显低，显著高于B组（P<0.05），E组SOD活性比D组高（P<0.05），与C组比较差异无统计学意义（P>0.05）；C组、D组、E组MDA水平均比B组低，GSH水平均高于B组，差异有统计学意义（P<0.05），与A组相比差异无统计学意义（P>0.05），C组、D组、E组间两两比较，差异无统计学意义（P>0.05）

3 讨论

百草枯中毒累及多个脏器，严重时可导致多器官功能不全，其中肺是主要靶器官，早期表现为急性肺损伤，其中毒机制目前尚未完全明确，可能与自由基氧化损伤、炎症反应及诱导细胞凋亡有关[6-7]。由于百草枯中毒发病机制不清，导致其临床治疗难度较大，尚无特效治疗方案，洗胃、催吐等基础治疗及血液净化是目前提高救治成功率的有效措施[8]，但临床效果并不理想，患者死亡率依然居高不下。endprint

急性肺损伤的出现使患者呼吸系统出现障碍，同时可能促进其他器官的损伤，导致患者最终死于脏器功能衰竭或呼吸衰竭。因此，及时有效地改善百草枯中毒患者早期急性肺损伤症状对提高患者生存率及抢救成功后的生存质量均具有重要意义。本次研究以百草枯诱导引发急性肺损伤的大鼠模型为研究对象，对血必净与盐酸氨溴索的作用展开观察。

本次研究结果显示，分别给予百草枯中毒大鼠血必净与盐酸氨溴索单药或联合治疗，统计分析后发现五组大鼠W/D比值、SOD活性及MDA、GSH水平组间差异幼统计学意义（P<0.05）。两两比较后可得出C组、D组、E组W/D比值较B组明显低，与A组相比差异无统计学意义（P>0.05），E组W/D比C组、D组低，差异有统计学意义（P<0.05），这说明血必净与盐酸氨溴索单药或联合治疗对于改善W/D均有良好效果，能促进肺间质及肺泡血管通透性改变，但是联合用药比单独用药疗效更为理想；C组、D组、E组SOD活性较A组明显低，显著高于B组（P<0.05），E组SOD活性比D组高（P<0.05），与C组比较差异无统计学意义（P>0.05），这体现了血必净与盐酸氨溴索单药或联合治疗均能提高SOD活性，间接帮助机体清除多余自由基，降低氧化应激损害；结果表明，单独应用盐酸氨溴索效果比单独应用血必净理想，但是两药联合作用疗效最佳；C组、D组、E组MDA水平均比B组低，GSH水平均高于B组，差异有统计学意义（P<0.05），与A组相比差异无统计学意义（P>0.05），C组、D组、E组间两两比较，差异无统计学意义（P>0.05），这说明血必净与盐酸氨溴索单药或联合治疗对于改善患者体内脂质过氧化反应有一定效果，但三种治疗方法的改善效果差异不显著。

综上所述，血必净与盐酸氨溴索均能降低百草枯中毒导致急性肺损伤大鼠体内的氧化应激反应，联合使用具有明确的疗效，可能存在协同作用，能为临床治疗提供一定参考；但目前缺乏对人体作用的临床研究，投入使用仍待进行深入、大样本量的研究。

参考文献

[1] Dinis-Oliveira R J，Duarte J A，Sanchez-Navarro A，et al.Paraquat poisonings：mechanisms of lung toxicity， clinical features， and treatment[J].Critical Reviews in Toxicology，2008，38（1）：13-71.

[2] Lee Y，Lee J H， Seong A J，et al.Arterial lactate as a predictor of mortality in emergency department patients with paraquat intoxication[J].Clinical Toxicology，2012，50（1）：52-56.

[3]王光權，王龙.血必净注射液对大鼠急性肺损伤的作用[J].现代预防医学，2011，38（5）：996-998.

[4]马玉腾，杜月菊，张军立，等.盐酸氨溴索对百草枯中毒大鼠肺SP-D表达及肺损伤的保护作用[J].中华急诊医学杂志，2013，22（7）：737-740.

[5]郭雪松.氨溴索对慢阻肺急性发作患者血清与痰液炎性介质的影响[J].海南医学院学报，2014，20（11）：1506-1508.

[6] Zhi Q M， Yang L T， Sun H C.Protective effect of ambroxol against parauat-induced pulmonary fibrosis in rats[J].Internal Medicine （Tokyo，Japan），2010，50（18）：1879-1887.

[7]葛玉霞.急性百草枯中毒肺损伤机制与保护研究的进展[J].中国急救医学，2012，32（6）：550-553.

[8]韦海涛，姜军，黄栋，等.血液净化治疗儿童急性中毒6例报告[J].贵州医药，2012，36（4）：329-330.

（收稿日期：2017-03-16）endprint