宋 跃 李淑娟 白晓明 张含国

(东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室，哈尔滨 150040)

响应面优化长白落叶松体胚形成早期培养条件的研究

宋 跃 李淑娟*白晓明 张含国

(东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室，哈尔滨 150040)

以长白落叶松胚性愈伤组织为材料，通过Box-Behnken Design设计试验，建立以体胚发生量为响应值的响应面模型，优化长白落叶松体胚形成早期的培养条件。结果表明：相对离子浓度(P=0.007)、肌醇浓度(P=0.000)、培养周期(P=0.000)、肌醇浓度与培养周期的交互作用(P=0.007)对长白落叶松体细胞胚胎发生量的影响极为显著。长白落叶松体胚形成早期的最适培养条件为：相对离子浓度26.767 7% BM、肌醇浓度10.454 5 g·L-1、培养周期12.656 6 d，预测体细胞胚胎的发生量为337.04 个·g-1。为便于实际操作，验证试验将培养条件调整为：离子浓度25% BM、肌醇浓度10 g·L-1、培养周期13 d，体胚平均发生量为336.46 个·g-1，与预测值336.29 个·g-1基本一致，体胚萌发率与生根率分别达100%和83.33±5.78%，与前期试验相比，长白落叶松体胚发生的数量和质量均有显著提高。

落叶松属；长白落叶松；响应面优化；体胚发生；胚胎形成早期

落叶松(LarixMill.)具早期速生、抗逆性强、轮伐期短等特点[1]，是我国东北地区三大针叶用材树种之一。长白落叶松(Larixolgensis)作为东北地区的优良乡土树种，其种源试验开展较早，自上世纪70年代末以来已有一批速生丰产、抗逆性强的优良长白落叶松家系被陆续选育出来，其栽培区不断向北延伸，推广面积超过60余万hm2[2]。但长白落叶松的种子产量不稳定[3]，有性生殖的子代变异大，许多优良性状难以维持，而扦插等无性繁殖也存在生根率较低等问题[2～4]，限制了落叶松良种的大规模繁育利用，难以满足林业生产的实际需求。……