魏林，梁志怀，成燕清

（1.湖南省农业科学院植物保护研究所，长沙，410125；2.湖南省农业生物技术研究中心）

子莲品种抗镰刀菌腐败病的室内鉴定方法

魏林1，梁志怀2，成燕清1

（1.湖南省农业科学院植物保护研究所，长沙，410125；2.湖南省农业生物技术研究中心）

应用莲籽萌发的实生苗浸根接种镰刀菌腐败病病原，根据接种实生苗叶片表现出的腐败病症状分级标准，对病害等级进行鉴定，进而确定子莲品种对腐败病菌的抗病能力。该方法实现了室内快速、准确鉴定不同子莲品种对镰刀菌腐败病的抗性。

莲籽；镰刀菌腐败病；快速鉴定；抗性

1 材料与方法

1.1 试验材料

①供试病原菌 从腐败病病组织分离经过单胞分离纯化后，再通过形态学、柯赫氏法则验证、分子鉴定确定的莲真菌性腐败病病原菌——尖孢镰刀菌莲专化型。

②供试子莲 选择颗粒饱满、充分成熟的当年莲籽作为供试材料。

③感病对照和抗病对照的选择 选择当地主栽的、历年腐败病发生较为严重的品种，作为感病对照；选择当地主栽的、历年腐败病发生较轻的品种，作为抗病对照。

1.2 试验方法

①子莲腐败病病原菌强致病性菌株的筛选供试腐败病镰刀菌病原菌用PDA培养基培养5 d后，用无菌打孔器自菌落边缘取7 mm的菌饼，纵剖切取大小一致的新鲜藕块，将菌饼置于藕块的中央位置，菌丝体面朝下，每个藕块等距离接种2个镰刀菌菌饼，然后将装有已接种藕块的发芽盒置于26℃恒温培养箱中保湿培养5～7 d。按下述分级标准调查藕块发病情况：0级，藕块生长正常、完好；……