郝阳阳 张梁宇 王翔 陆亚琪 朱晓杨 陈杨

313000浙江湖州，安徽医科大学解放军九八临床学院 解放军第九八医院皮肤科（郝阳阳、张梁宇、陆亚琪、朱晓杨、陈杨），药械科（王翔）

·论著·

喜树碱对HaCaT细胞自噬的影响

郝阳阳 张梁宇 王翔 陆亚琪 朱晓杨 陈杨

313000浙江湖州，安徽医科大学解放军九八临床学院 解放军第九八医院皮肤科（郝阳阳、张梁宇、陆亚琪、朱晓杨、陈杨），药械科（王翔）

目的 探讨喜树碱对HaCaT细胞自噬的影响。方法 将HaCaT细胞分为对照组和实验组，对照组用0.1%二甲基亚砜处理，实验组分别用5、10、25、50、100、200 nmol∕L浓度的喜树碱处理。不同浓度喜树碱作用于HaCaT细胞24、48 h，用CCK8法检测细胞增殖情况，流式细胞仪检测药物作用24 h后细胞凋亡情况，免疫印迹法检测自噬相关微管相关蛋白1轻链3（LC3）、p62的变化；选取10 nmol∕L喜树碱作用于HaCaT细胞24 h，间接免疫荧光法检测细胞自噬蛋白LC3的变化。结果5、10 nmol∕L喜树碱对HaCaT细胞增殖、凋亡无显著影响，50、100、200 nmol∕L喜树碱作用HaCaT细胞24 h，增殖抑制率分别为（31.23±1.00）%，（54.21±8.10）%，（66.75±10.70）%；25、50、100、200 nmol∕L喜树碱作用HaCaT细胞48 h，增殖抑制率分别为（25.81±5.99）%、（44.35±5.32）%、（65.81±8.28）%、（73.23±9.59）%，与同时段对照组相比，差异有统计学意义（均P＜0.001）。50、100、200 nmol∕L喜树碱作用HaCaT细胞24 h，凋亡率分别为（14.46±2.38）%、（19.15±1.59）%、（29.88±1.37）%，与对照组（3.80±0.13）%比较，差异有统计学意义（均P＜0.001）。5、10 nmol∕L喜树碱处理HaCaT细胞24 h后，LC3Ⅱ表达上调，p62蛋白表达下调。间接免疫荧光显示10 nmol∕L喜树碱作用HaCaT细胞24 h后，实验组与对照组自噬体阳性细胞百分率分别为（36.67±4.55）%、（6.23±0.92）%，两组差异有统计学意义（t=6.546，P=0.003）。结论 5、10 nmol∕L喜树碱可诱导HaCaT细胞发生自噬，但对细胞增殖、凋亡无影响。50、100、200 nmol∕L喜树碱抑制HaCaT细胞增殖，促使细胞发生凋亡，自噬水平降低。

银屑病；喜树碱；自噬；……