舒佳为　袁芳　文楚毛　杨光忠

摘要：利用溶剂提取法，正、反相硅胶柱和半制备高效液相色谱法对巴东冬凌草乙酸乙酯提取物进行了分离纯化，从中分离得6个二萜化合物，并根据理化性质和现代波谱技术对其进行了结构鉴定，其结构分别鉴定为：冬凌草甲素（1）、lasiodin（2）、neolaxiflorin U（3）、hubeirubesin K（4）、hubeirubesin I（5）、epinodosinol（6）。其中化合物3～6为首次从该地区的植物中分离得到。

关键词：巴东冬凌草；化学成分；二萜

中图分类号：R927

文献标识码：A文章编号：16749944（2017）18021603

1引言

冬凌草系唇形科香茶菜属植物碎米桠（Rabdosia rubescens（Hemsl.） Hara）的地上部分，由于其冬天全株结满薄如蝉翼的银白色冰凌片，又名冰凌草 ＼[1＼]。收载于2015年版《中国药典》，味甘苦、性微寒，具有清熱解毒、消炎止痛等功效＼[2＼]。冬凌草富含对映-贝壳杉烯二萜类化合物，其代表性化合物为冬凌草甲素，具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性＼[3＼]。目前，国内学者相继对产自河南、河北、贵州、湖北等多个不同地区的冬凌草的化学成分进行了广泛深入的研究，发现不同地区的冬凌草都富含对映-贝壳杉烯二萜类化合物，但不同产地的冬凌草含有不同结构特点的二萜，呈现化学结构的多样性＼[4～7＼]。近年从湖北建始产的冬凌草中分得3个结构新颖的二萜生物碱＼[8＼]，为进一步发现新的二萜化合物，笔者对产自湖北巴东冬凌草的二萜成分进行了的研究，从其乙酸乙酯提取物分离得6个二萜化合物，其结构分别鉴定为冬凌草甲素（1）、lasiodin（2）、neolaxiflorin U（3）、hubeirubesin K（4）、hubeirubesin I（5）、epinodosinol（6）。其中化合物3～6为首次从该地区的植物中分离得到（图1）。

2材料与方法

2.1仪器与试剂

核磁共振波谱仪（Bruker AVANCEIII-500 MHz全数字化超导核磁共振仪，布鲁克公司）；高效液相色谱仪（Ultimate 3000半制备型，美国戴安公司），VWD，DAD检测器；半制备型色谱柱为5C18-MS-II（250 mm×10 mm，5 μm）；柱色谱用硅胶（200～300目和300～400目，青岛海洋化工厂）；分析纯溶剂由国药集团化学试剂有限公司生产；色谱纯溶剂由昌泰兴业有限公司生产。

冬凌草采于湖北恩施土家苗族自治州巴东县，经中南民族大学生命科学学院宋发军教授鉴定为唇形科香茶菜属植物碎米桠（Rabdosia rubescens（Hemsl.） Hara）。

2.2提取与分离

11.2 kg干燥冬凌草粉碎后用95%的乙醇室温浸泡3次，每次24 h，提取液真空抽滤后减压旋蒸得乙醇提取物。乙醇提取物用甲醇溶解，石油醚脱脂3次后，减压旋蒸脱去甲醇，然后用水溶解，乙酸乙酯萃取3次，得乙酸乙酯提取物556 g，乙酸乙酯提取物经硅胶柱（200～300目）层析分离，用氯仿∶丙酮（10∶0，9∶1，8∶2，7∶3，6∶4，1∶1，3∶7，0∶10）梯度洗脱，TLC检测后合并相似组分，共收集到8个组分（Fr. A～H）。Fr. F（51.3 g）经反相硅胶柱色谱分离，用水∶甲醇（7∶3，1∶1，8∶2，3∶7，0∶10）梯度洗脱以及反复硅胶柱层析和半制备高效液相色谱得到化合物1～6。

3结构鉴定

4结语

对产自湖北巴东冬凌草的二萜成分进行了研究，从中分离得6个二萜化合物，其结构分别鉴定为冬凌草甲素（1）、lasiodin（2）、neolaxiflorin U（3）、hubeirubesin K（4）、hubeirubesin I（5）、epinodosinol（6）。研究结果表明：巴东冬凌草富含对映-贝壳杉烯二萜类化合物，其中冬凌草甲素的含量高，结构类型以7，20-环氧类为主，同主产区河南济源的冬凌草所含的活性成分极为相似，具有很好的开发价值。

参考文献：

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Diterpenoids From Badong Rabdosia rubescens （Hemsl.） Hara

Shu Jiawei1， Yuan Fang2， Wen Chumao2， Yang Guangzhong3

（1. College of Environment and Bio-resources， Dalian Minzu University， Dalian 116600， China；

2. College of Biomedical Engineering， South Central University for Nationalities， Wuhan 430074， China；

3. National Demonstration Center for Experimental Ethnopharmacology Education，

South-Central University for Nationalities， Wuhan 430074， China）

Abstract： The chemical constituents of Badong Rabdosia rubescens were isolated and purified by solvent extraction method， the normal and reverse phase silica gel column chromatography and semi-preparative HPLC. Their structures were elucidated on the basis of chemical and spectroscopic analysis. Six diterpenoids were isolated from the ethyl acetate extract of Rabdosia rubescens and were identified as oridonin （1） lasiodin （2） neolaxiflorin U （3） hubeirubesin K （4） hubeirubesin I （5） epinodosinol （6） Compound 3-6 were isolated from Badong Rabdosia rubescens for the first time.

Key words： Rabdosia rubescens； chemical Constituents； diterpenoidsendprint